Diagnosticum eritrositik salmonella vi antijenik. Analitik ve teşhis performansı
Fiyat: istek üzerine
Miktar belirterek sepetinize ürün ekleyebilirsiniz
Diagnosticum Salmonella VI-antijenik reaktif seti, pasif hemaglütinasyon reaksiyonunda (RPHA) insan kan serumunda Salmonella typhus Wi-antijenine özgü antikorların saptanması için tasarlanmıştır.
ÖZELLİKLERİ AYARLA
2.1. Yöntemin prensibi.
Diagnosticum Salmonella VI-antijenik'in aktif prensibi, eritrositlerin yüzeyine sabitlenmiş Vi-antijendir. B-antijenine karşı antikor içeren serumlar ile etkileşime girdiğinde, eritrosit aglütinasyonu olgusu gözlenir.
2.2. KİTİN YAPISI
Reaktifler | numara |
Diagnosticum eritrosit salmonella Vi-antijenik sıvı - fosfat tampon çözeltisi (pH 7.2) içinde Salmonella typhus'un Vi antijeni ile formalize edilmiş ve duyarlı hale getirilmiş% 1'lik bir koç eritrosit süspansiyonudur. + 0.2; konsantrasyon 0.06 mol / l). Pulsuz homojen kahverengi süspansiyon; çökelme üzerine, 2 katman oluşur: yoğun kahverengi bir eritrosit çökeltisi ve şeffaf sarımsı bir süpernatant | 1 şişe - 3 ml |
Teşhis serum salmonella adsorbe Ви reseptörü kuru -kahverengimsi renk tonu ile beyazdan bej rengine kadar homojen kütle | 1 şişe - 0,1 ml'den itibaren |
% 1 formalize, hassaslaştırılmamış koyun eritrositleri süspansiyonu - pulsuz homojen kahverengi süspansiyon; çökelme üzerine, 2 katman oluşur: yoğun kahverengi bir eritrosit çökeltisi ve şeffaf sarımsı bir süpernatant | 1 şişe - |
Serum seyreltme solüsyonu ve RPHA üretimi -% 0,9 sodyum klorür çözeltisi, berrak renksiz bir sıvıdır, pH 6,5 ila 7,5 | 2 şişe - her biri 8 ml |
İmmünolojik reaksiyonlar için tek kullanımlık yuvarlak tabanlı plaka -her biri şeffaf, renksiz, yuvarlak tabanlı 12 delikli 8 sıradan oluşur | 1 bilgisayar |
ANALİTİK VE DİYAGNOSTİK ÖZELLİKLER.
3.1. Diagnosticum, RPHA'da en az 1: 160 dilüsyonda Salmonella adsorbe edilmiş B ve B reseptörü kuru tanısal serum ile aglütine edilmelidir.
Sağlıklı insanların kan serumunun tanısal özelliklerinin koşullu seviyesi, 1: 20'den yüksek olmayan bir serum dilüsyonu olarak kabul edilmelidir.
3.2. Analiz süresi 2 saattir.
3.3. Set, 8 tanım için tasarlanmıştır.
ÖNLEMLER
Kitle çalışırken, SSCB Sağlık Bakanlığı'nın sıhhi ve epidemiyolojik kurumlarının laboratuvarlarında (bölümler, bölümler) çalışırken cihaz, güvenlik önlemleri, endüstriyel sanitasyon, anti-salgın rejim ve kişisel hijyen kuralları dikkate alınmalıdır (Moskova, 1981).
Analiz edilen serumlar ve bunlarla temas halindeki reaktifler, potansiyel olarak enfeksiyöz olarak kabul edilmeli, HIV, hepatit virüsü veya viral enfeksiyona neden olan diğer herhangi bir ajanı uzun süre muhafaza edebilir veya iletebilir - dikkatli kullanılmalıdır:
- lastik eldivenlerle çalışmak;
- pipetleme yaparken otomatik pipetler kullanmalısınız;
- işin tamamlanmasının ardından, analiz edilen serumlar ve bunlarla temas eden reaktifler, aletler dezenfektan solüsyonla muamele edilmelidir.
- ekipmanı işten önce ve sonra% 70 etil alkol ile silin.
Analiz edilen serumlar 30 dakika 56 ° C'de inaktive edilmelidir.
Kitte bulunan tanı serumu Salmonella adsorbe Bi reseptörü inaktive edilmiştir
Objektif test sonuçları aşağıdaki koşullar altında garanti edilir:
- kit içindeki tüm reaktifleri 2 ila 8 0 С arasındaki sıcaklıklarda saklayın;
- son kullanma tarihi geçmiş reaktifleri kullanmayın;
- ambalajları uygun şekilde etiketlenmemişse kit reaktiflerini kullanmayın;
- rPHA için sadece bu kitte bulunan reaktifleri kullanın.
04.04.2016 tarihli RZN 2016/3905 kayıt sertifikası
Randevu
"Diagnosticum erythrocytic salmonella Vi-antijen for RPHA" (SED-Vi) reaktif seti, pasif hemaglütinasyon reaksiyonu (RPHA) ile insan kan serumunda tifoya neden olan maddenin Vi antijenine karşı antikorların saptanması için tasarlanmıştır.
Karakteristik ayarla
Çalışma prensibi
Tifo ateşine neden olan maddeye karşı antikorların varlığında, vi-antijen ile duyarlılaştırılmış tavuk eritrositlerinin hemaglütinasyonu gözlenir ve bu, tabletin U şeklindeki oyuklarının dibinde yerleşik bir eritrosit "şemsiyesi" oluşumuna yol açar. Tifo ateşine neden olan maddeye karşı antikorların yokluğunda, yerleşmiş eritrositler bir "nokta" oluşturur.
Kompozisyonu ayarla
Reaktif adı | Açıklama | Bir sette miktar |
---|---|---|
Diagnosticum eritrosit salmonella Vi-antijenik, kuru% 6 (EDC) | S. typhi Vi antijeni ile duyarlılaştırılmış formalize tavuk eritrositleri. Kahverengi renkli kuru higroskopik kütle. Çözünmeden sonra süspansiyon kırmızı-kahverengidir. | 1 şişe 0.6 ml |
Teşhis serum salmonella adsorbe, Vi reseptörü, kuru (dilüsyon 1:20, (K +)) | Tavşan serumu salmonella adsorbe edilmiş, Vi reseptörü, dilüsyon 1:20. Kuru higroskopik beyaz gözenekli kütle. Çözünmeden sonra - berrak sarımsı bir sıvı veya renksiz. | 1 şişe 0.3 ml |
Örnek seyreltici (RIP) | Berrak mavi-mor sıvı. | 1 şişe, 10 ml |
Fosfat tamponlu salin (PBS) | Şeffaf renksiz sıvı. | 1 şişe, 10 ml |
İmmünolojik reaksiyonlar için tek kullanımlık polimer plaka | Şeffaf, renksiz polistirenden yapılmış immünolojik reaksiyonlar için tek kullanımlık polimerik plaka. | 1 BİLGİSAYAR. |
Teşhis özellikleri
Diagnosticum, RPHA'da diagnostik salmonella adsorbe edilmiş serum, Vi reseptörü, kuru (1:20 seyreltide) ile serum etiketinde belirtilen titreye aglütine edilmelidir. Sağlıklı insanların kan serumunun tanısal özelliklerinin koşullu seviyesi, 1: 20'den yüksek olmayan bir serum dilüsyonu olarak kabul edilmelidir. Analiz süresi 3040 dakikadır. Kit, tarama versiyonunda 42 kan serumu veya titrasyon versiyonunda 10 kan serumu çalışması için tasarlanmıştır.
Önlemler
Kit yalnızca in vitro tanı amaçlı kullanım içindir. Kitte bulunan maddeler inaktive ve güvenlidir. Kit ile çalışırken, SP 1.3.2322-08 ve SanPiN 2.1.7.2790-10 dikkate alınmalıdır.
Ek ekipman ve malzemeler
Ekipmanlar, malzemeler, çözümler:
- değişken doz hacmi 5 - 40 μl olan 1 kanallı pipet dağıtıcıları; 40 - 200 ul; 200 - 1000 μl ve 1000 - 5000 μl;
- değişken dozaj hacmi 5 - 40 μl ve 40 - 200 μl olan 8 veya 12 kanallı pipet dağıtıcıları;
- damıtılmış su (GOST 6709-72).
Analiz edilen örnekler
İncelenen kan serumu numuneleri, kan numunesi alma anından itibaren 3 günden fazla olmamak üzere 2 ila 8 ° C arasında bir sıcaklıkta saklanır. Serumun 1 yıldan fazla olmamak üzere eksi 18 ° C'den yüksek olmayan bir sıcaklıkta donmuş halde saklanmasına izin verilir. Kullanımdan önce örnekler 16 ila 25 ° C sıcaklıkta çözülür ve çalkalanarak karıştırılır. Yeniden dondurmaya izin verilmez. Bakteri üremesi ve hemolizli numuneleri kullanmayın. Reaksiyonu kurmadan önce test edilen serumlar 30 dakika 56 ° C'de ısıtılır.
Analiz
Kontrol teşhis serumunun (K +) hazırlanması
0,3 ml (K +) 'dan kuru (seyreltme 1:20) tanı salmonella adsorbe edilmiş serum, Vi reseptörü, kuru bir çalışma çözeltisi hazırlayın. Bunun için 0.3 ml fosfat tamponlu salin (PBS) K + içeren şişenin içeriğine eklenir. Kalan serum miktarı bölünebilir ve en fazla 6 ay süreyle eksi 18 ° C'yi geçmeyen bir sıcaklıkta dondurulmuş olarak saklanabilir.
Eritrosit salmonella (EDS) tanısının hazırlanması
Bir eritrositik salmonella diagnostiği süspansiyonunun çalışma seyreltisini hazırlamak için, kuru% 6 EDMS'li bir şişenin içeriğine 0.6 ml damıtılmış su eklenir ve 16 ila 25 ° C sıcaklıkta 2 saat hidrasyona bırakılır. Daha sonra solüsyona 2.4 ml fosfat tamponlu salin (PBS) eklenir. Çalışma solüsyonu 1 aydan fazla olmamak üzere 2 ila 8 ° C sıcaklıkta saklanır. Dondurmaya izin verilmez.
Kan serumu taraması için RPHA evreleme
Tarama çalışmaları için kan serumu, plaka oyuklarında aşağıdaki şekilde seyreltilir:
- plakanın ilk kuyularında 1: 20'lik ön dilüsyonlar hazırlanır, önce 190 μl RIP solüsyonu, ardından 10 μl çalışılan serum eklenir. Her serum ayrı bir uçla eklenir ve dikkatlice pipetlenir (serumları ekledikten sonra kuyucuklardaki çözeltinin rengi mavi-mordan yeşile değişmelidir);
- İkinci kuyularda önce 25 μl PBS solüsyonu ve ardından 25 μl önceden seyreltilmiş serum eklenerek ve iyice pipetlenerek 1:40 tarama seyreltileri hazırlanır.
Her RPHA ayarında, K + titresinin bir kontrol tespitinin yapılması gerekir. Bunu yapmak için, uzun bir sıranın 8 deliğine 50 μl PBS solüsyonu eklenir. Daha sonra, ilk kuyucuğa 50 μl çalışma solüsyonu K + (1:20) eklenir, dikkatlice pipetlenir ve sonraki kuyucuklara aktarılır, her biri 50 μl, 1: 40'tan 1: 5120'ye kadar 2 kat seyreltme alınır. Diğer 4 oyukta, spontan hemaglütinasyon olmaması için SED'yi kontrol etmek için 50 μl PBS çözeltisi eklenir.
İncelenen serumların (RIP içeren ilk olanlar hariç) ve kontrollerin tarama dilüsyonları ile plakanın tüm kuyucuklarında 25 μl EDM ekleyin. SED süspansiyonunu kullanmadan önce bir şişe veya tepsi içinde karıştırın! Tablet iyice çalkalanır ve kontroldeki eritrositler tamamen yerleşene kadar 30 ila 40 dakika 16 ila 25 ° C'lik bir sıcaklıkta bırakılır.
İncelenen kan serumlarının titrasyonu sırasında RPHA formülasyonu
Çalışılan seranın titrasyonu ve çalışma solüsyonu K +, plakanın kısa sıralarında gerçekleştirilir. EDS'nin spontan hemaglütinasyonunun yokluğunu kontrol etmek için başka bir kısa sıra kullanılır.
Test serumunun titrasyonu için kısa sıraların ilk kuyularında 180 μl RIP solüsyonu ekleyin. Diğer tüm kuyular 50 μl PBS solüsyonu ekler.
RIP solüsyonu bulunan kuyucuklarda, incelenen serumlardan 20 μl ekleyin (1:10 seyreltme elde edin). Her serum kendi ucu ile eklenir ve dikkatlice pipetlenir (kuyucuklardaki solüsyonun rengi mavi menekşeden yeşile değişmelidir). Daha sonra, ilk kuyulardan, 50 μl, 1:20 ila 1: 1280 arasında iki kat seyreltme alarak sıraların sonraki kuyucuklarına aktarılır. Titrasyonun sonunda, son kuyulardan 50 μl hacmindeki solüsyonlar çıkarılır.
Her RPHA ayarında, K + titresinin bir kontrol tespitinin yapılması gerekir. Bunu yapmak için, uzun bir sıranın 8 deliğine 50 μl PBS solüsyonu eklenir. Daha sonra, 50 μl K + çalışma solüsyonu (1:20) ilk kuyucuğa eklenir, dikkatlice pipetlenir ve sonraki kuyucuklara aktarılır, her biri 50 μl, 1:40 ila 1: 5120 arasında 2 kat seyreltme alınır.
Spontan hemaglutinasyon yokluğu için diagnostiği kontrol etmek için, kısa bir sıranın tüm kuyucuklarına 50 μl PBS solüsyonu eklenir.
Tüm kuyucuklarda (RIP içeren çalışılan serumlar için her sıranın ilk kuyucukları hariç) 25 μl EDM ekleyin. SED süspansiyonunu kullanmadan önce bir şişe veya tepsi içinde karıştırın! Tablet iyice çalkalanır ve kontroldeki eritrositler tamamen yerleşene kadar 30 ila 40 dakika 16 ila 25 ° C'lik bir sıcaklıkta bırakılır.
Sonuçların muhasebeleştirilmesi ve yorumlanması
Kan serumu taranırken sonuçların dikkate alınması
Sonuçlar, geleneksel dört çarpı ölçeğine göre kaydedilir. Serum titresi, en az 3 (+++) çapraz hemaglütinasyon sağlayan seyreltme olarak kabul edilir.
- ++++ (4+) - aglütine eritrositler, deliğin dibinde ters bir "şemsiye" oluşturur, kenarları düşer;
- +++ (3+) - aglütine eritrositler deliğin dibinde ters bir "şemsiye" oluşturur, kenarları eşittir;
- ++ (2+) - kuyunun dibinde aglütine eritrositlerle birlikte küçük bir aglütine olmayan eritrosit "halkası" şeklinde bir tortu vardır;
- + (1+) - eritrositlerin çoğu aglütine olmaz ve küçük bir "halka" şeklinde yerleşir;
- (-) - aglütine olmayan eritrositler kuyunun dibinde bir "nokta" oluşturur.
Pozitif bir sonuç, Vi antijeni ile yüklenmiş eritrositlerin en az 3 çapraz (+++) ile hemaglütinasyonu olarak kabul edilir.
Diagnostiğin kalite kontrolü, içine sadece PBS solüsyonu ve SED'nin eklendiği kontrol sırasının 4 kuyusudur. Bu kuyularda spontan hemaglütinasyon olmamalıdır - reaksiyon negatiftir (-). Aksi takdirde çalışma tekrarlanmalıdır. Tekrarlanan ayar sırasında hemaglütinasyon görülürse, ilaç kullanılmaz.
Negatif sonuçlu seranın 1:40 ve altındaki bir diagnostik titrede Vi antijenine karşı antikor içermediği düşünülmelidir.
1:40 seyreltmede pozitif sonuç veren sera, titresini belirlemek için varyantta serum titrasyonu ile tekrar test edilmelidir.
Kan serumu titre edilirken sonuçların dikkate alınması
Serum titresi, 3 (+++) çaprazlamadan daha az olmayan hemaglütinasyon sağlayan seyreltme olarak kabul edilir.
Teşhisin kalite kontrolü, SED kontrolü için sıranın kuyularındadır. Bu kuyularda spontan hemaglütinasyon olmamalıdır - reaksiyon negatiftir (-). Aksi takdirde çalışma tekrarlanmalıdır. Tekrarlanan ayar sırasında hemaglütinasyon görülürse, ilaç kullanılmaz.
TANI (Yunanca, tanıyabilen diagnostikos) - serolojik reaksiyonlar için antijen olarak kullanılan nötralize mikroorganizmaların süspansiyonları. Canlı kültürlerle çalışmanın tehlikesi, değişkenlik yetenekleri ve geniş antijenik bağlantıların varlığı, D'nin kullanılmasını tavsiye eder - belirli antijenik bileşenleri içeren daha standart ve homojen preparatlar.
D.'nin yardımıyla, organizmanın bağışıklık durumunu teşhis etmek ve incelemek için insan ve hayvanların serumlarında aglütinasyon, pasif (dolaylı) hemaglütinasyon (RPHA) vb. Reaksiyonlarında spesifik antikorlar tespit edilir.
D. özellikle bağırsak enfeksiyonları için laboratuar çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, bağırsak bakterilerinin antijenik yapısının genelliği, çapraz reaksiyonların varlığını belirler ve antikorların farklı şekilde tespit edilmesini gerektirir. Bu amaçla, bireysel antijenlerin seçici olarak bastırılması gerçekleştirilir: Fenol veya formalin yardımıyla, Felix ve Olitsky (A. Felix, L. Olitzki, 1928) tarafından önerildiği gibi, O-aglutinabiliteyi bastırırlar. Şarap ve Sontag yöntemine göre alkol ile hareket ederek veya Kauffmann'a göre ısıtarak, inaktive edilmiş flagellar antijen ile O-teşhisi elde edilir. Daha da umut verici olan, ilkesi F.G.Berngoff (1944) tarafından geliştirilen mono diagnostik cihazların kullanılmasıdır. Bu ilaçlar yalnızca bir antijenik bileşen içerir ve yalnızca belirli spesifik antikorlarla etkileşime girer.
Bakteriyel D.'nin özelliklerini liyofilizasyon yoluyla koruma olasılığı gösterilmiştir (bkz.).
D., çeşitli enfeksiyonların serolojik tanısı için kullanılan, temelde benzerdir, ancak bu ilaçların belirli türlerinin belirli özellikleri vardır.
RPHA'nın bakteriyel aglütinasyona göre daha duyarlı ve spesifik olduğu genel olarak kabul edilmektedir. RPHA'da antijen olarak Boivin ve Westphal yöntemleriyle elde edilen antijenlerle duyarlı hale getirilen formalize eritrositler kullanılmaktadır.
Dokulardaki antijeni, hastaların deşarjını, çeşitli maddelerin özütlerini vb. Tespit etmek için eritrosit D'yi kullanmak da mümkündür. Bu durumlarda, antikorlar tarafından hassaslaştırılmış eritrositler kullanılır - "antikor teşhisi".
Viral D. esas olarak kompleman fiksasyonu (RSK), RTGA ve nötralizasyon reaksiyonunun reaksiyonunda kullanılır. Çeşitli şekillerde işlenmiş (inaktive edilmiş) aşılanmış kültür sıvılarından hazırlanırlar.
Ana D.'nin kısa bir açıklaması ve uygulamalarının kapsamı tabloda sunulmuştur.
Bilimsel çalışmada kullanılan deneysel ilaçlar da vardır: eritrositik kolidiagnostikumlar, difteri eritrositik D., parotit virüslerinin hemaglütinasyon antijenleri, kızamık hemaglütinasyon antijeni vb.
Tablo. Ana teşhislerin ve uygulamalarının amacının kısa açıklaması
Teşhisler |
kısa bir açıklama |
Uygulamanın amacı (deneğin serumu kullanılır) |
Bakteriyel teşhis |
||
Bağırsak ailesinden bakterilerden teşhisler: Shigella Flexner, Sonne, Newcastle; salmonella tifüs (OH, O), paratifoid ateş A ve B, kolera suis, typhimurium, enteritis |
Mikrobiyal süspansiyon (1 ml'de 3 milyar mikrobiyal cisim),% 0.4-0.5 formalin solüsyonu ile inaktive edilmiştir |
Hastalığın teşhisi olan kamayı netleştirmek için aglütinasyon reaksiyonunun ifadesi |
Salmonella O-teşhisi (2, 4, 7, 8, 9 ve 3, 10) |
% 15 gliserin çözeltisi ile inaktive edilmiş, seçilmiş suşlardan elde edilen, kısmi O-antijen (1 ml'de 3 milyar mikrobiyal cisim) içeren mikrobiyal süspansiyon |
Salmonellozda O-antikorları tespit etmek için bir aglütinasyon reaksiyonu kurma |
Salmonella H-monodiagnosticums (a, b, c, d, eh, c, k, lv, gm, p, st ve ikinci fazın antijenleri - 1, 2, 5, 6, 7) |
1. ve 2. fazların flagellar antijeninin bileşenlerini içeren mikrobiyal süspansiyon (1 ml'de 3 milyar mikrobiyal cisim), seçilmiş suşlardan elde edilmiş,% 0,5 formalin çözeltisi ile inaktive edilmiş |
Teşhis amaçlı H-antikorlarını tespit etmek ve hastalığın bir geçmişini oluşturmak için bir aglütinasyon reaksiyonunun evrelendirilmesi |
Vi-diagnostik |
Vi-faktörü içeren suşlardan mikrobiyal süspansiyon (1 ml'de 3 milyar mikrobiyal cisim),% 0,4 formalin çözeltisi ve% 0,6 kalsiyum klorür çözeltisi ile işlenmiş |
Tifo bakteri taşıyıcılarını tanımlamak için bir aglütinasyon reaksiyonu oluşturma |
Bruselloz tek tanı |
% 12 sodyum klorür çözeltisi içinde bir brusella süspansiyonu, mavi renk ve% 0.5 fenol çözeltisi ile inaktive edildi |
Aglütinasyon testinin ayarlanması (Wright'ın testi ve enfekte insanları ve hayvanları tanımlamak için Huddleson testi - bkz. Bruselloz, araştırma yöntemleri) |
Tularemia diagnostik |
% 0.5 formalin solüsyonu ile inaktive edilmiş aşı suşunun mikrobiyal süspansiyonu (1 ml'de 25 milyar mikrobiyal cisim) |
Serodiagnostikler için cam üzerinde hacimsel damla aglütinasyon reaksiyonunun beyanı ve aşılananların bağışıklık durumunun incelenmesi |
Leptospirosis teşhisi |
En yaygın serotiplerin 11 suşunun liyofilize mikrobiyal süspansiyonu |
Kamanın doğrulanması, hastalığın teşhisi için RSK beyanı |
Rickettsial teşhis |
Korpüsküler antijenler - enfekte kemirgenlerden tavuk embriyolarının sarısı keselerinde büyüyen riketsiya süspansiyonu veya eter, celite veya diferansiyel santrifüj ile tedavi edilen pulmoner riketsiyal materyal |
Rickettsiozların ayırıcı tanısı için aglütinasyon reaksiyonu beyanı |
Shigella Flexner'dan eritrosit teşhisi - Sonne |
Boivin, Westphalia, vb. Antijenlerle duyarlı hale getirilmiş formalize eritrositler. |
Dizanteri kama "teşhisini açıklığa kavuşturmak için RPGA beyanı |
Eritrosit salmonella Vi-diagnostik |
Saflaştırılmış Vi antijeni ile duyarlı hale getirilmiş formalize eritrositler |
Tifo bakteri taşıyıcılığının tespiti için RPHA beyanı |
Eritrosit salmonella O-teşhisi (1, 2, 12; 1, 4, 12; 6, 7; 6, 8; 1, 9, 12; 3, 10 ve kompleks) |
Boivin, Westphalia, vb. Antijenleri ile duyarlı hale getirilmiş formalize eritrositlerin% 1 süspansiyonu |
Hastalığın kama "teşhisini açıklığa kavuşturmak için RPHA beyanı |
Liyofilize tularemi eritrosit diagnostiği |
Tularemia antijeni ile duyarlı hale getirilmiş formalize liyofilize eritrositler |
Antijen tespiti için kama, tularemi teşhisi ve ayrıca antikorların nötralizasyon reaksiyonunu açıklığa kavuşturmak için RPHA beyanı |
Virüs teşhisi |
||
Aşı virüsü antijeni |
Tavuk embriyolarının koryon-allantoik zarı üzerinde kültürlenmiş canlı ineklerdeki çiçek hastalığı virüsünün kuru hazırlanması |
Hastalarda ve aşılanmış hastalarda antihemaglutininleri tespit etmek için RPHA beyanı |
Adenovirüse özgü antijen |
Transplante edilebilir bir hücre kültürü A-1 (tüm adenovirüslerde ortak antijen) içinde tip 6 virüs kültürlenerek hazırlanmıştır |
Hastaların serumundaki tamamlayıcı bağlayıcı antikorları tespit etmek için CSC'lerin ayarlanması |
Kene kaynaklı ensefalit teşhisi ve etiyolojik olarak buna benzer hastalıklar |
Kama, hastalığın teşhisini açıklığa kavuşturmak için RSK ve RTGA beyanı |
|
Ornitoit antijen |
Haşlanmış aşılanmış tavuk embriyolarının yumurta sarısı keselerinden kuru preparat, eterle ekstrakte edilir, aseton ile çökeltilir ve merthiolate ile inaktive edilir. |
İnsanlarda, kuşlarda ve hayvanlarda ornitoz teşhisi için RSK formülasyonu |
Kuru grip teşhisi |
Formalin, merthiolate ile inaktive edilmiş influenza virüsü tip A, B veya C suşlarından biri ile enfekte olan gelişmekte olan tavuk embriyolarının allantoik sıvısı. İnfluenza virüsünün antijenik yapısının değişkenliğinden dolayı, üretim suşlarının sık sık değiştirilmesi sağlanır. |
Hastalığın teşhisini, takozu netleştirmek için RTGA beyanı |
RTGA için parainfluenza diagnostik tip 1, 2, 3, kuru |
Parainfluenza virüs suşlarından birini içeren, tween-80, eter ve merthiolate ile işlenmiş kültür sıvısı (insan embriyonik böbreği) |
Hastalığın teşhisi olan takozu netleştirmek için RTGA açıklaması |
Kaynakça: Zuev AS Tifo bakterilerinin kronik taşıyıcılarını, Zhurn, micr., Epid ve immun tespit etmek için Bakteriyel vi-diagnostik, No. 2, s. 51, 1959, bibliogr .; Zuev AS, Novoselova AI ve Likina IV O-diagnostik ve H-monodiyagnostiklerin üretimi için bir tekniğin geliştirilmesi ve bunların salmonelloz serodiyagnostiklerinde uygulanması, ibid., No. 3, s. 42, 1956; İmmünoloji ve önleme bağırsak enfeksiyonları, ed. S.I.Didenko, s. 180, M., 1962; Karalnik BV Erythrocytic diagnostics, M., 1976; Bulaşıcı hastalıkların mikrobiyolojik teşhisi için kılavuzlar, ed. K. I. Matveeva, s. 172, M., 1973; Subbotina Yu.L. ve diğerleri. Eritrosit ve bakteriyel O-diagnostik reaksiyonlarda salmonelloz ve antijenik bağlantıların serolojik teşhisi, Zhurn, micr., Epid ve immun., No. 3, s. 19, 1970, bibliogr.
L.B. Epifani.
04.04.2016 tarihli RZN 2016/3905 kayıt sertifikası
Randevu
"Diagnosticum erythrocytic salmonella Vi-antijen for RPHA" (SED-Vi) reaktif seti, pasif hemaglütinasyon reaksiyonu (RPHA) ile insan kan serumunda tifoya neden olan maddenin Vi antijenine karşı antikorların saptanması için tasarlanmıştır.
Karakteristik ayarla
Çalışma prensibi
Tifo ateşine neden olan maddeye karşı antikorların varlığında, vi-antijen ile duyarlılaştırılmış tavuk eritrositlerinin hemaglütinasyonu gözlenir ve bu, tabletin U şeklindeki oyuklarının dibinde yerleşik bir eritrosit "şemsiyesi" oluşumuna yol açar. Tifo ateşine neden olan maddeye karşı antikorların yokluğunda, yerleşmiş eritrositler bir "nokta" oluşturur.
Kompozisyonu ayarla
Reaktif adı | Açıklama | Bir sette miktar |
---|---|---|
Diagnosticum eritrosit salmonella Vi-antijenik, kuru% 6 (EDC) | S. typhi Vi antijeni ile duyarlılaştırılmış formalize tavuk eritrositleri. Kahverengi renkli kuru higroskopik kütle. Çözünmeden sonra süspansiyon kırmızı-kahverengidir. | 1 şişe 0.6 ml |
Teşhis serum salmonella adsorbe, Vi reseptörü, kuru (dilüsyon 1:20, (K +)) | Tavşan serumu salmonella adsorbe edilmiş, Vi reseptörü, dilüsyon 1:20. Kuru higroskopik beyaz gözenekli kütle. Çözünmeden sonra - berrak sarımsı bir sıvı veya renksiz. | 1 şişe 0.3 ml |
Örnek seyreltici (RIP) | Berrak mavi-mor sıvı. | 1 şişe, 10 ml |
Fosfat tamponlu salin (PBS) | Şeffaf renksiz sıvı. | 1 şişe, 10 ml |
İmmünolojik reaksiyonlar için tek kullanımlık polimer plaka | Şeffaf, renksiz polistirenden yapılmış immünolojik reaksiyonlar için tek kullanımlık polimerik plaka. | 1 BİLGİSAYAR. |
Teşhis özellikleri
Diagnosticum, RPHA'da diagnostik salmonella adsorbe edilmiş serum, Vi reseptörü, kuru (1:20 seyreltide) ile serum etiketinde belirtilen titreye aglütine edilmelidir. Sağlıklı insanların kan serumunun tanısal özelliklerinin koşullu seviyesi, 1: 20'den yüksek olmayan bir serum dilüsyonu olarak kabul edilmelidir. Analiz süresi 3040 dakikadır. Kit, tarama versiyonunda 42 kan serumu veya titrasyon versiyonunda 10 kan serumu çalışması için tasarlanmıştır.
Önlemler
Kit yalnızca in vitro tanı amaçlı kullanım içindir. Kitte bulunan maddeler inaktive ve güvenlidir. Kit ile çalışırken, SP 1.3.2322-08 ve SanPiN 2.1.7.2790-10 dikkate alınmalıdır.
Ek ekipman ve malzemeler
Ekipmanlar, malzemeler, çözümler:
- değişken doz hacmi 5 - 40 μl olan 1 kanallı pipet dağıtıcıları; 40 - 200 ul; 200 - 1000 μl ve 1000 - 5000 μl;
- değişken dozaj hacmi 5 - 40 μl ve 40 - 200 μl olan 8 veya 12 kanallı pipet dağıtıcıları;
- damıtılmış su (GOST 6709-72).
Analiz edilen örnekler
İncelenen kan serumu numuneleri, kan numunesi alma anından itibaren 3 günden fazla olmamak üzere 2 ila 8 ° C arasında bir sıcaklıkta saklanır. Serumun 1 yıldan fazla olmamak üzere eksi 18 ° C'den yüksek olmayan bir sıcaklıkta donmuş halde saklanmasına izin verilir. Kullanımdan önce örnekler 16 ila 25 ° C sıcaklıkta çözülür ve çalkalanarak karıştırılır. Yeniden dondurmaya izin verilmez. Bakteri üremesi ve hemolizli numuneleri kullanmayın. Reaksiyonu kurmadan önce test edilen serumlar 30 dakika 56 ° C'de ısıtılır.
Analiz
Kontrol teşhis serumunun (K +) hazırlanması
0,3 ml (K +) 'dan kuru (seyreltme 1:20) tanı salmonella adsorbe edilmiş serum, Vi reseptörü, kuru bir çalışma çözeltisi hazırlayın. Bunun için 0.3 ml fosfat tamponlu salin (PBS) K + içeren şişenin içeriğine eklenir. Kalan serum miktarı bölünebilir ve en fazla 6 ay süreyle eksi 18 ° C'yi geçmeyen bir sıcaklıkta dondurulmuş olarak saklanabilir.
Eritrosit salmonella (EDS) tanısının hazırlanması
Bir eritrositik salmonella diagnostiği süspansiyonunun çalışma seyreltisini hazırlamak için, kuru% 6 EDMS'li bir şişenin içeriğine 0.6 ml damıtılmış su eklenir ve 16 ila 25 ° C sıcaklıkta 2 saat hidrasyona bırakılır. Daha sonra solüsyona 2.4 ml fosfat tamponlu salin (PBS) eklenir. Çalışma solüsyonu 1 aydan fazla olmamak üzere 2 ila 8 ° C sıcaklıkta saklanır. Dondurmaya izin verilmez.
Kan serumu taraması için RPHA evreleme
Tarama çalışmaları için kan serumu, plaka oyuklarında aşağıdaki şekilde seyreltilir:
- plakanın ilk kuyularında 1: 20'lik ön dilüsyonlar hazırlanır, önce 190 μl RIP solüsyonu, ardından 10 μl çalışılan serum eklenir. Her serum ayrı bir uçla eklenir ve dikkatlice pipetlenir (serumları ekledikten sonra kuyucuklardaki çözeltinin rengi mavi-mordan yeşile değişmelidir);
- İkinci kuyularda önce 25 μl PBS solüsyonu ve ardından 25 μl önceden seyreltilmiş serum eklenerek ve iyice pipetlenerek 1:40 tarama seyreltileri hazırlanır.
Her RPHA ayarında, K + titresinin bir kontrol tespitinin yapılması gerekir. Bunu yapmak için, uzun bir sıranın 8 deliğine 50 μl PBS solüsyonu eklenir. Daha sonra, ilk kuyucuğa 50 μl çalışma solüsyonu K + (1:20) eklenir, dikkatlice pipetlenir ve sonraki kuyucuklara aktarılır, her biri 50 μl, 1: 40'tan 1: 5120'ye kadar 2 kat seyreltme alınır. Diğer 4 oyukta, spontan hemaglütinasyon olmaması için SED'yi kontrol etmek için 50 μl PBS çözeltisi eklenir.
İncelenen serumların (RIP içeren ilk olanlar hariç) ve kontrollerin tarama dilüsyonları ile plakanın tüm kuyucuklarında 25 μl EDM ekleyin. SED süspansiyonunu kullanmadan önce bir şişe veya tepsi içinde karıştırın! Tablet iyice çalkalanır ve kontroldeki eritrositler tamamen yerleşene kadar 30 ila 40 dakika 16 ila 25 ° C'lik bir sıcaklıkta bırakılır.
İncelenen kan serumlarının titrasyonu sırasında RPHA formülasyonu
Çalışılan seranın titrasyonu ve çalışma solüsyonu K +, plakanın kısa sıralarında gerçekleştirilir. EDS'nin spontan hemaglütinasyonunun yokluğunu kontrol etmek için başka bir kısa sıra kullanılır.
Test serumunun titrasyonu için kısa sıraların ilk kuyularında 180 μl RIP solüsyonu ekleyin. Diğer tüm kuyular 50 μl PBS solüsyonu ekler.
RIP solüsyonu bulunan kuyucuklarda, incelenen serumlardan 20 μl ekleyin (1:10 seyreltme elde edin). Her serum kendi ucu ile eklenir ve dikkatlice pipetlenir (kuyucuklardaki solüsyonun rengi mavi menekşeden yeşile değişmelidir). Daha sonra, ilk kuyulardan, 50 μl, 1:20 ila 1: 1280 arasında iki kat seyreltme alarak sıraların sonraki kuyucuklarına aktarılır. Titrasyonun sonunda, son kuyulardan 50 μl hacmindeki solüsyonlar çıkarılır.
Her RPHA ayarında, K + titresinin bir kontrol tespitinin yapılması gerekir. Bunu yapmak için, uzun bir sıranın 8 deliğine 50 μl PBS solüsyonu eklenir. Daha sonra, 50 μl K + çalışma solüsyonu (1:20) ilk kuyucuğa eklenir, dikkatlice pipetlenir ve sonraki kuyucuklara aktarılır, her biri 50 μl, 1:40 ila 1: 5120 arasında 2 kat seyreltme alınır.
Spontan hemaglutinasyon yokluğu için diagnostiği kontrol etmek için, kısa bir sıranın tüm kuyucuklarına 50 μl PBS solüsyonu eklenir.
Tüm kuyucuklarda (RIP içeren çalışılan serumlar için her sıranın ilk kuyucukları hariç) 25 μl EDM ekleyin. SED süspansiyonunu kullanmadan önce bir şişe veya tepsi içinde karıştırın! Tablet iyice çalkalanır ve kontroldeki eritrositler tamamen yerleşene kadar 30 ila 40 dakika 16 ila 25 ° C'lik bir sıcaklıkta bırakılır.
Sonuçların muhasebeleştirilmesi ve yorumlanması
Kan serumu taranırken sonuçların dikkate alınması
Sonuçlar, geleneksel dört çarpı ölçeğine göre kaydedilir. Serum titresi, en az 3 (+++) çapraz hemaglütinasyon sağlayan seyreltme olarak kabul edilir.
- ++++ (4+) - aglütine eritrositler, deliğin dibinde ters bir "şemsiye" oluşturur, kenarları düşer;
- +++ (3+) - aglütine eritrositler deliğin dibinde ters bir "şemsiye" oluşturur, kenarları eşittir;
- ++ (2+) - kuyunun dibinde aglütine eritrositlerle birlikte küçük bir aglütine olmayan eritrosit "halkası" şeklinde bir tortu vardır;
- + (1+) - eritrositlerin çoğu aglütine olmaz ve küçük bir "halka" şeklinde yerleşir;
- (-) - aglütine olmayan eritrositler kuyunun dibinde bir "nokta" oluşturur.
Pozitif bir sonuç, Vi antijeni ile yüklenmiş eritrositlerin en az 3 çapraz (+++) ile hemaglütinasyonu olarak kabul edilir.
Diagnostiğin kalite kontrolü, içine sadece PBS solüsyonu ve SED'nin eklendiği kontrol sırasının 4 kuyusudur. Bu kuyularda spontan hemaglütinasyon olmamalıdır - reaksiyon negatiftir (-). Aksi takdirde çalışma tekrarlanmalıdır. Tekrarlanan ayar sırasında hemaglütinasyon görülürse, ilaç kullanılmaz.
Negatif sonuçlu seranın 1:40 ve altındaki bir diagnostik titrede Vi antijenine karşı antikor içermediği düşünülmelidir.
1:40 seyreltmede pozitif sonuç veren sera, titresini belirlemek için varyantta serum titrasyonu ile tekrar test edilmelidir.
Kan serumu titre edilirken sonuçların dikkate alınması
Serum titresi, 3 (+++) çaprazlamadan daha az olmayan hemaglütinasyon sağlayan seyreltme olarak kabul edilir.
Teşhisin kalite kontrolü, SED kontrolü için sıranın kuyularındadır. Bu kuyularda spontan hemaglütinasyon olmamalıdır - reaksiyon negatiftir (-). Aksi takdirde çalışma tekrarlanmalıdır. Tekrarlanan ayar sırasında hemaglütinasyon görülürse, ilaç kullanılmaz.