آنتی ژنیک Diagnosticum erythrocytic salmonella vi. عملکرد تحلیلی و تشخیصی
قیمت: بنا به درخواست
با تعیین مقدار می توانید کالایی را به سبد خرید خود اضافه کنید
مجموعه ای از معرف های Diagnosticum Salmonella VI-antigenic برای تشخیص آنتی بادی های خاص آنتی ژن سالمونلا تیفوس Wi-anti در آنتی ژن خون انسان در واکنش هماگلوتیناسیون منفعل (RPHA) در نظر گرفته شده است.
مشخصات را تنظیم کنید
2.1 اصل روش
اصل فعال ضد عفونی کننده Diagnosticum Salmonella VI ، آنتی ژن Vi است که روی سطح گلبول های قرمز ثابت شده است. هنگام تعامل با سرم های حاوی آنتی بادی های آنتی ژن B ، پدیده آگلوتیناسیون گلبول های قرمز مشاهده می شود.
2.2. ترکیب کیت
معرف ها | میزان |
مایع آنتی ژنیک VI ، سالمونلا گلبول قرمز Diagnosticum - یک سوسپانسیون 1٪ گلبول های قرمز قوچ است که با آنتی ژن Vi سالمونلا تیفوس در محلول بافر فسفات رسمیت یافته و حساس می شود (pH 7.2 + 0.2؛ غلظت 0.06 mol / l). سوسپانسیون قهوه ای همگن بدون پوسته پوسته شدن ؛ پس از نشست ، 2 لایه تشکیل می شود: یک رسوب قهوه ای متراکم از گلبول های قرمز و یک ماده مایع رویی مایل به زرد شفاف | 1 بطری - 3 میلی لیتر |
گیرنده وی جذب شده توسط سالمونلا سرم تشخیصی خشک است -جرم همگن از سفید با رنگ قهوه ای تا بژ | 1 بطری - از 0.1 میلی لیتر |
تعلیق 1٪ گلبول های قرمز گوسفندی رسمی و غیر حساس - تعلیق قهوه ای همگن بدون پوسته پوسته شدن ؛ پس از نشست ، 2 لایه تشکیل می شود: یک رسوب قهوه ای متراکم از گلبول های قرمز و یک ماده مایع رویی مایل به زرد شفاف | 1 بطری - |
محلول برای رقت های سرمی و تولید RPHA -0.9٪ محلول کلرید سدیم یک مایع شفاف و بی رنگ با pH 6.5 تا 7.5 است | 2 بطری - هر کدام 8 میلی لیتر |
صفحه یکبار مصرف ته گرد برای واکنشهای ایمنی -از 8 ردیف تشکیل شده است که هر کدام شامل 12 سوراخ با ته شفاف ، بی رنگ و گرد است | 1 کامپیوتر |
مشخصات تجزیه و تحلیل و تشخیص.
3.1 Diagnosticum باید در RPHA توسط سرم تشخیصی گیرنده های B و B جذب شده توسط سالمونلا در رقت حداقل 1: 160 تجمع یابد.
سطح شرطی ویژگیهای تشخیصی سرم خون افراد سالم باید رقت سرمی بالاتر از 1:20 باشد.
3.2 زمان تجزیه و تحلیل 2 ساعت است.
3.3 این مجموعه برای 8 تعریف طراحی شده است.
موارد احتیاط
هنگام کار با کیت ، باید "قوانین مربوط به دستگاه ، اقدامات احتیاطی ایمنی ، بهداشت صنعتی ، رژیم ضد اپیدمی و بهداشت شخصی هنگام کار در آزمایشگاه ها (بخش ها ، بخش ها) موسسات بهداشتی و اپیدمیولوژیک سیستم وزارت بهداشت اتحاد جماهیر شوروی سوسیالیستی (م. ، 1981)"
سرم های تجزیه و تحلیل شده و همچنین معرف هایی که در تماس با آنها هستند ، باید به عنوان یک عفونت بالقوه در نظر گرفته شوند ، قادر به حفظ یا انتقال HIV ، ویروس هپاتیت یا هر عامل مسبب دیگر عفونت ویروسی برای مدت طولانی - آنها باید با احتیاط کنترل شوند:
- کار با دستکش لاستیکی
- هنگام pipet کردن ، باید از pipet های خودکار استفاده کنید.
- پس از اتمام کار ، سرم های تجزیه و تحلیل شده و معرف هایی که در تماس با آنها هستند ، ابزار باید با یک محلول ضد عفونی کننده درمان شوند
- وسایل قبل و بعد از کار را با الکل اتیل 70٪ پاک کنید.
سرم های مورد تجزیه و تحلیل باید در دمای 56 درجه سانتی گراد به مدت 30 دقیقه غیرفعال شوند.
گیرنده B و B جذب شده سالمونلا در سرم تشخیصی غیرفعال است.
نتایج آزمون عینی تحت شرایط زیر تضمین می شود:
- تمام معرفهای کیت را در دمای 2 تا 8 0 درجه سانتیگراد ذخیره کنید.
- از معرفهایی که منقضی شده اند استفاده نکنید.
- اگر بر روی بسته بندی آنها برچسب گذاری نشده است از معرفهای کیت استفاده نکنید.
- برای انجام معرفهای RPGA که فقط در این کیت موجود است.
گواهی ثبت نام شماره RZN 2016/3905 مورخ 04.04.2016
وقت ملاقات
مجموعه معرف ها "Diagnosticum erythrocytic salmonella Vi-antigen for RPHA" (SED-Vi) برای شناسایی آنتی بادی های آنتی ژن Vi عامل آن تیفوئید در سرم خون انسان با واکنش هماگلوتیناسیون منفعل (RPHA) است.
مشخصه را تنظیم کنید
اصول کارکرد، اصول جراحی، اصول عملکرد
در حضور آنتی بادی های عامل تب تیفوئید ، هماگلوتیناسیون گلبول های قرمز مرغ حساس به آنتی ژن مشاهده می شود که منجر به تشکیل "چتر" گلبول های قرمز مستقر در پایین چاه های U شکل قرص می شود. در صورت عدم وجود آنتی بادی در برابر عامل بیماری تب حصبه ، گلبول های قرمز مستقر "یک نقطه" را تشکیل می دهند.
تنظیم ترکیب
نام معرف | شرح | مقدار در یک مجموعه |
---|---|---|
Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigenic، 6٪ خشک (EDC) | گلبول های قرمز مرغ فرمالین شده با آنتی ژن S. typhi Vi حساس شده اند. توده رطوبت خشک از رنگ قهوه ای. پس از انحلال ، سوسپانسیون قرمز قهوه ای است. | 1 بطری ، از 0.6 میلی لیتر |
جذب سالمونلا سرم تشخیصی ، گیرنده Vi ، خشک (رقت 1:20 ، (K +)) | سالمونلا سرم خرگوش جذب شده ، گیرنده Vi ، رقت 1:20. توده متخلخل سفید رطوبت دار خشک. پس از انحلال ، این یک مایع مایل به زرد مایل به زرد یا بی رنگ است. | 1 بطری ، از 0.3 میلی لیتر |
رقیق کننده نمونه (RIP) | مایع آبی-بنفش را شفاف کنید. | 1 بطری ، 10 میلی لیتر |
نمک بافر فسفات (PBS) | مایع بی رنگ شفاف. | 1 بطری ، 10 میلی لیتر |
صفحه پلیمری یکبار مصرف برای واکنشهای ایمنی | صفحه پلیمری یکبار مصرف برای واکنشهای ایمنی ساخته شده از پلی استایرن بی رنگ شفاف. | 1 کامپیوتر. |
مشخصات تشخیصی
Diagnosticum باید در RPHA با سرم جذب شده توسط سالمونلا ، گیرنده Vi ، خشک (با رقت 1:20) تا تیتر مشخص شده روی برچسب سرم آگلوتین شود. سطح شرطی ویژگیهای تشخیصی سرم خون افراد سالم باید رقت سرمی بالاتر از 1:20 باشد. زمان تجزیه و تحلیل 3040 دقیقه است. این کیت برای مطالعه 42 سرم خون در نسخه غربالگری یا 10 سرم خون در نسخه تیتراسیون طراحی شده است.
موارد احتیاط
این کیت فقط برای استفاده در موارد آزمایشگاهی است. مواد موجود در کیت غیرفعال و بی خطر هستند. هنگام کار با کیت ، SP 1.3.2322-08 و SanPiN 2.1.7.2790-10 باید رعایت شود.
تجهیزات و مواد اضافی
تجهیزات ، مواد ، راه حل ها:
- توزیع کننده های پیپت 1 کاناله با حجم دوز متغیر 5 - 40 میکرولیتر. 40 - 200 میکرولیتر 200 - 1000 میکرولیتر و 1000 - 5000 میکرولیتر ؛
- توزیع کننده های پیپت 8- یا 12 کاناله با حجم دوز متغیر 5 - 40 میکرولیتر و 40 - 200 میکرولیتر ؛
- آب مقطر (GOST 6709-72).
نمونه های آنالیز شده
نمونه های سرم خون بررسی شده در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد بیش از 3 روز از لحظه جمع آوری خون ذخیره می شوند. نگهداری سرم در حالت منجمد در دمای بالاتر از منفی 18 درجه سانتیگراد برای مدت بیش از 1 سال مجاز است. قبل از استفاده ، نمونه ها در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد ذوب شده و با تکان دادن مخلوط می شوند. انجماد مجدد مجاز نیست. از نمونه هایی که رشد باکتری و همولیز دارند نباید استفاده شود. قبل از تنظیم واکنش ، سرم های آزمایش شده به مدت 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد گرم می شوند.
تحلیل و بررسی
آماده سازی سرم تشخیصی کنترل (K +)
یک محلول محلول از سرم جذب شده سالمونلا ، گیرنده Vi ، خشک (رقت 1:20) از 0.3 میلی لیتر (K +) تهیه کنید. برای این منظور ، 0.3 میلی لیتر نمک بافر فسفات (PBS) به محتوای ویال با K + اضافه می شود. مقدار باقیمانده سرم را می توان تقسیم کرد و به مدت بیش از 6 ماه در دمای بیش از منفی 18 درجه سانتیگراد ذخیره کرد.
تهیه روش تشخیصی سالمونلا گلبول قرمز (EDS)
برای تهیه رقت کاری سوسپانسیون گلبول قرمز سالمونلا دیاستیکوم ، 0.6 میلی لیتر آب مقطر به محتوای ویال با EDMS 6٪ خشک اضافه شده و به مدت 2 ساعت در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد برای هیدراتاسیون باقی می ماند. سپس 2.4 میلی لیتر محلول بافر فسفات (PBS) به محلول اضافه می شود. محلول کار بیش از 1 ماه در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد ذخیره می شود. انجماد مجاز نیست.
مرحله سازی RPHA برای غربالگری سرم خون
سرم خون برای مطالعات غربالگری در چاه های صفحه بشکل زیر رقیق می شود:
- رقتهای اولیه 1:20 در اولین چاههای صفحه تهیه می شوند ، ابتدا 190 میکرولیتر محلول RIP و سپس 10 میکرولیتر از سرم های مورد مطالعه اضافه می شود. هر سرم با یک نوک جداگانه اضافه می شود و با دقت پیپت می شود (رنگ محلول در چاه ها پس از افزودن سرم باید از آبی بنفش به سبز تغییر کند).
- رقت های غربالگری 1:40 در چاه های دوم با افزودن 25 میکرولیتر محلول PBS و سپس 25 میکرولیتر سرم رقیق شده قبلی و پیپت کاملاً تهیه می شود.
در هر تنظیم RPHA ، لازم است تعیین كنترل تیتر K + انجام شود. برای انجام این کار ، 50 میکرولیتر محلول PBS به 8 سوراخ یک ردیف طولانی اضافه می شود. سپس 50 میکرولیتر از محلول کار K + (1:20) به چاه اول اضافه می شود ، با دقت پیپت می شود و به داخل چاه های بعدی منتقل می شود ، هر کدام 50 میکرولیتر ، رقت های 2 برابر را از 1:40 تا 1: 5120 دریافت می کند. در 4 چاه دیگر ، 50 میکرولیتر محلول PBS برای کنترل SED در صورت عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خود اضافه می شود.
در همه چاههای صفحه با رقتهای غربالگری سرمهای مورد مطالعه (به جز موارد اول حاوی RIP) و شاهدها 25 میکرولیتر EDM اضافه می کنند. سوسپانسیون SED را قبل از استفاده در ویال یا سینی هم بزنید! قرص کاملاً تکان داده می شود و در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 تا 40 دقیقه باقی می ماند تا اینکه گلبول های قرمز کنترل کاملاً جا بیفتند.
فرمولاسیون RPHA در هنگام تیتراسیون سرم خون مورد مطالعه
تیتراسیون سرم های مورد مطالعه و محلول کار K + در ردیف های کوتاه صفحه انجام می شود. یک ردیف کوتاه دیگر برای کنترل عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خودی EDMS استفاده می شود.
در اولین چاه های ردیف های کوتاه برای تیتراسیون سرم آزمایش ، 180 میکرولیتر محلول RIP اضافه می شود. همه چاه های دیگر 50 میکرولیتر محلول PBS اضافه می کنند.
در چاههای دارای محلول RIP ، 20 میکرولیتر از سرم های مورد مطالعه اضافه کنید (رقت 1:10 بدست آورید). هر سرم با نوک مخصوص خود اضافه می شود و با دقت پیپت می شود (رنگ محلول در چاه ها باید از آبی بنفش به سبز تغییر کند). سپس از اولین چاه ها ، 50 میکرولیتر با دریافت رقت های دو برابر از 1:20 تا 1: 1280 به چاه های بعدی ردیف ها منتقل می شوند. در پایان تیتراسیون ، محلول های موجود در حجم 50 میکرولیتر از آخرین چاه ها خارج می شوند.
در هر تنظیم RPHA ، لازم است تعیین كنترل تیتر K + انجام شود. برای انجام این کار ، 50 میکرولیتر محلول PBS به 8 سوراخ یک ردیف طولانی اضافه می شود. سپس 50 میکرولیتر از محلول کار K + (1:20) به چاه اول اضافه می شود ، با دقت پیپت می شود و به داخل چاه های بعدی منتقل می شود ، هر کدام 50 میکرولیتر ، رقت های 2 برابر را از 1:40 تا 1: 5120 دریافت می کند.
برای کنترل عیب یابی عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خود ، 50 میکرولیتر محلول PBS به تمام چاه های یک ردیف کوتاه اضافه می شود.
در همه چاه ها (به استثنای اولین چاه های هر ردیف برای سرم های مورد مطالعه حاوی RIP) 25 میکرولیتر EDM اضافه کنید. سوسپانسیون SED را قبل از استفاده در ویال یا سینی هم بزنید! قرص کاملاً تکان داده می شود و در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 تا 40 دقیقه باقی می ماند تا اینکه گلبول های قرمز کنترل کاملاً جا بیفتند.
حسابداری و تفسیر نتایج
در نظر گرفتن نتایج هنگام غربالگری سرم خون
نتایج با توجه به مقیاس مرسوم چهار تلاقی ثبت می شود. تیتر سرم رقت آن در نظر گرفته می شود ، که حداقل با 3 (+++) کراس هماگلوتیناسیون می دهد.
- ++++ (4+) - گلبول های قرمز آگلوتین شده در پایین سوراخ "چتر" معکوس تشکیل می دهند ، لبه های آن می افتد.
- +++ (3+) - گلبول های قرمز آگلوتین شده "چتری" معکوس در پایین سوراخ ایجاد می کنند ، لبه های آن یکنواخت است.
- ++ (2+) - همراه با گلبول های قرمز آگلوتین شده در پایین چاه رسوبی به شکل یک "حلقه" کوچک از گلبول های قرمز غیر آگلوتین شده وجود دارد.
- + (1+) - اکثر گلبول های قرمز آگلوتین نشده و به شکل یک "حلقه" کوچک ته نشین می شوند.
- (-) - گلبول های قرمز غیر آگلوتین شده "نقطه" ای را در پایین چاه تشکیل می دهند.
یک نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود که هماگلوتیناسیون گلبول های قرمز است که با حداقل 3 عبور (+++) با آنتی ژن Vi بارگیری می شوند.
کنترل کیفیت عیب یابی 4 حلقه ردیف کنترل است که فقط محلول PBS و SED به آنها اضافه می شود. در این چاهها نباید هماگلوتیناسیون خودبخودی وجود داشته باشد - واکنش منفی است (-). در غیر این صورت ، مطالعه باید تکرار شود. اگر هماگلوتیناسیون هنگام تنظیم مکرر ظاهر شود ، از دارو استفاده نمی شود.
سرم های با نتیجه منفی باید فاقد آنتی بادی به آنتی ژن Vi در یک تیتر تشخیصی 1:40 به پایین باشد.
سرمهایی که در رقت 1:40 نتیجه مثبتی می دهند باید در واریانت با تیتراسیون سرم آزمایش شوند تا تیتر آن ثابت شود.
در نظر گرفتن نتایج هنگام تیتراسیون سرم خون
تیتر سرم رقت آن است که باعث هماگلوتیناسیون کمتر از 3 (+++) کراس می شود.
كنترل كیفیت تشخیصی چاه های ردیف كنترل SED است. در این چاهها نباید هماگلوتیناسیون خودبخودی وجود داشته باشد - واکنش منفی است (-). در غیر این صورت ، مطالعه باید تکرار شود. اگر هماگلوتیناسیون هنگام تنظیم مکرر ظاهر شود ، از دارو استفاده نمی شود.
DIAGNOSTICUM (یونانی ، diagnostikos قادر به تشخیص است) - سوسپانسیون میکروارگانیسم های خنثی شده به عنوان آنتی ژن برای واکنش های سرولوژی استفاده می شود. خطر کار با فرهنگهای زنده ، قابلیت تغییرپذیری آنها و وجود اتصالات گسترده آنتی ژنیک استفاده از D. - داروهای استاندارد و همگن تر حاوی برخی از اجزای آنتی ژنی را توصیه می کند.
با کمک D. ، در واکنش های آگلوتیناسیون ، هماگلوتیناسیون غیر فعال (غیرمستقیم) (RPHA) و غیره ، آنتی بادی های خاصی در سرم های انسان و حیوانات تشخیص داده می شود تا وضعیت ایمنی بدن را تشخیص و مطالعه کند.
D. به ویژه به طور گسترده ای در مطالعات آزمایشگاهی برای عفونت روده استفاده می شود. با این حال ، کلیت ساختار آنتی ژنی باکتریهای روده وجود واکنشهای متقابل را تعیین می کند و نیاز به تشخیص افتراقی آنتی بادی ها دارد. برای این منظور ، سرکوب انتخابی آنتی ژن های منفرد انجام می شود: آنها با کمک فنل یا فرمالین ، قابلیت چسبندگی O را سرکوب می کنند ، همانطور که توسط Felix و Olitsky پیشنهاد شده است (A. Felix، L. Olitzki، 1928). با تأثیر بر روی الکل مطابق با روش Wien و Sontag یا با حرارت دادن طبق Kauffmann ، O-diagnosticum با آنتی ژن تاژک غیرفعال بدست می آید. حتی بیشتر امیدوار کننده استفاده از تک تشخیصی است که اصل ایجاد آن توسط F.G.Berngoff (1944) ایجاد شده است. این داروها فقط حاوی یک جز anti آنتی ژنی هستند و فقط با برخی از آنتی بادی های خاص تداخل می کنند.
امکان حفظ خواص D. باکتریایی توسط لیوفیلیزه شدن آنها نشان داده شده است (نگاه کنید به).
D. ، که برای تشخیص عفونتهای مختلف مورد استفاده قرار می گیرد ، اساساً مشابه هستند ، با این حال ، انواع خاصی از این داروها ویژگی خاصی دارند.
به طور کلی پذیرفته شده است که RPHA حساس تر و خاص تر از تجمع باکتری است. گلبولهای قرمز فرمالین شده حساس شده با آنتی ژنهای بدست آمده از روشهای Boivin و Westphal بعنوان آنتی ژن در RPHA استفاده می شوند.
همچنین می توان از گلبول قرمز برای تشخیص آنتی ژن در بافت ها ، ترشح بیماران ، عصاره مواد مختلف و غیره استفاده کرد. در این موارد ، از گلبول های قرمز حساس با آنتی بادی ها - "تشخیص آنتی بادی" استفاده کنید.
ویروس D. عمدتا در واکنش تثبیت کننده مکمل (RSK) ، RTGA و واکنش خنثی سازی استفاده می شود. آنها از مایعات کشت واکسینه شده به روش های مختلف فرآوری شده (غیر فعال) تهیه می شوند.
شرح مختصری از اصلی D. و دامنه کاربرد آنها در جدول ارائه شده است.
داروهای تجربی نیز در کارهای علمی مورد استفاده قرار می گیرند: گلبول های قرمز ، گلبول قرمز دیفتری ، آنتی ژن های هماگلوتین کننده ویروس های اوریون ، آنتی ژن هماگلوتین کننده سرخک و غیره
جدول. شرح مختصری از اصلی ترین عیب های تشخیصی و هدف از کاربرد آنها
عیب های تشخیصی |
شرح مختصری از |
هدف برنامه (سرم موضوع استفاده می شود) |
تشخیص باکتریایی |
||
تشخیص از باکتریهای خانواده روده: شیگلا فلکسنر ، سون ، نیوکاسل ؛ سالمونلا تیفوس (OH ، O) ، تب پاراتیفوئید A و B ، سوئر وبا ، تیفیموریوم ، آنتردیدیس |
سوسپانسیون میکروبی (3 میلیارد بدن میکروبی در 1 میلی لیتر) ، با محلول فرمالین 0.4-0.5٪ غیرفعال می شود |
بیانیه واکنش آگلوتیناسیون برای روشن شدن گوه ، تشخیص بیماری |
تشخیص سالمونلا O (2 ، 4 ، 7 ، 8 ، 9 و 3 ، 10) |
سوسپانسیون میکروبی حاوی آنتی ژن O جزئی (3 میلیارد بدن میکروبی در 1 میلی لیتر) ، به دست آمده از سویه های انتخاب شده ، با محلول 15٪ گلیسیرین غیرفعال می شود |
تنظیم واکنش آگلوتیناسیون برای شناسایی آنتی بادی های O در سالمونلوز |
سالمونلا H-monodiagnosticums (a ، b ، c ، d ، eh ، c ، k ، lv ، gm ، p ، st و آنتی ژن های فاز دوم - 1 ، 2 ، 5 ، 6 ، 7) |
سوسپانسیون میکروبی حاوی اجزای آنتی ژن تاژک دار فازهای 1 و 2 (3 میلیارد بدن میکروبی در 1 میلی لیتر) ، به دست آمده از سویه های انتخاب شده ، با محلول فرمالین 0.5٪ غیرفعال می شود |
مرحله سازی واکنش آگلوتیناسیون برای شناسایی آنتی بادی های H برای اهداف تشخیصی و ایجاد سابقه بیماری |
Vi-diagnosticum |
سوسپانسیون میکروبی (3 میلیارد بدن میکروبی در 1 میلی لیتر) از سویه های حاوی فاکتور Vi ، تیمار شده با محلول فرمالین 0.4٪ و محلول کلرید کلسیم 0.6٪ |
تنظیم واکنش آگلوتیناسیون برای شناسایی حامل های باکتریایی حصبه |
بروسلوز تک تشخیصی |
سوسپانسیون بروسلا در محلول کلرید سدیم 12٪ ، آبی رنگ و با محلول فنل 0.5٪ غیرفعال شده است |
انجام آزمایش آگلوتیناسیون (آزمایش رایت و آزمایش هادلسون برای شناسایی افراد و حیوانات آلوده - رجوع کنید به بروسلوز ، روش های تحقیق) |
Tularemia diagnosticum |
سوسپانسیون میکروبی (25 میلیارد بدن میکروبی در 1 میلی لیتر) سویه واکسن ، با محلول فرمالین 0.5٪ غیرفعال می شود |
بیانیه واکنش آگلوتیناسیون قطره ای حجمی روی شیشه برای تشخیص عیب و بررسی وضعیت ایمنی واکسن زده ها |
تشخیص لپتوسپیروز |
سوسپانسیون میکروبی لیوفیلیزه شده 11 سویه از رایج ترین سروتیپ ها |
بیانیه RSK برای تأیید گوه ، تشخیص بیماری |
تشخیص Rickettsial |
آنتی ژن های عضلانی - سوسپانسیون ریکتزیایی که در کیسه های زرده جنین مرغ یا مواد ریکتسیال ریوی از جوندگان آلوده رشد می کند ، با اتر ، سلیت یا سانتریفیوژ دیفرانسیل درمان می شود |
بیانیه واکنش آگلوتیناسیون برای تشخیص افتراقی ریکتزیوز |
تشخیص گلبول قرمز |
||
تشخیص گلبول قرمز از Shigella Flexner - Sonne |
گلبول های قرمز رسمی شده با آنتی ژن های Boivin ، Westphal و غیره حساس می شوند. |
بیانیه RPGA برای روشن کردن گوه "تشخیص اسهال خونی |
گلبول قرمز سالمونلا Vi-diagnosticum |
گلبول های قرمز فرمالین شده با آنتی ژن Vi خالص سازی شده حساس می شوند |
بیانیه RPHA برای تشخیص حمل باکتری حصبه |
تشخیص O تشخیصی سالمونلا گلبول قرمز (1 ، 2 ، 12 ؛ 1 ، 4 ، 12 ؛ 6 ، 7 ؛ 6 ، 8 ؛ 1 ، 9 ، 12 ؛ 3 ، 10 و پیچیده) |
تعلیق 1٪ گلبول های قرمز رسمیت یافته با آنتی ژن های Boivin ، Westphal و غیره حساس شده است. |
بیانیه RPHA برای روشن کردن گوه "تشخیص بیماری |
تولارمی لیوفیل شده گلبول قرمز تشخیصی |
گلبول های قرمز لیوفیلیزه شده با آنتی ژن تولارمی حساس شده است |
بیانیه RPHA برای روشن کردن گوه ، تشخیص تولارمی و همچنین واکنش خنثی سازی آنتی بادی ها برای تشخیص: آنتی ژن |
تشخیص ویروس |
||
آنتی ژن ویروس واکسن |
آماده سازی خشک ویروس واکسن زنده روی غشای کوریون-آلانتوئیک رویان مرغ کشت شده است |
بیانیه RPHA برای شناسایی آنتی هماگلوتینین ها در بیماران و واکسینه شده ها |
آنتی ژن خاص آدنو ویروس |
تهیه شده با کشت ویروس نوع 6 در کشت سلولی پیوندی A-1 (آنتی ژن مشترک در همه آدنو ویروس ها) |
تنظیم CSC برای تشخیص آنتی بادی های متصل به مکمل در سرم بیماران |
تشخیص انسفالیت منتقله از طریق کنه و بیماری هایی از نظر اتیولوژیکی مشابه آن |
بیانیه RSK و RTGA برای روشن شدن گوه ، تشخیص بیماری |
|
آنتی ژن اورنیتوئید |
آماده سازی خشک از کیسه های زرده واکسینه شده جوشانده جنین مرغ ، استخراج شده با اتر ، رسوب با استون و غیرفعال شدن با مرتیولات |
فرمول RSK برای تشخیص اورنیتوز در انسان ، پرندگان و حیوانات |
تشخیص آنفلوانزا خشک است |
مایع آلانتوئیک در حال رشد جنین مرغ آلوده به یکی از سویه های ویروس آنفلوانزا نوع A ، B یا C ، غیرفعال شده با فرمالین ، مرتیولات. با توجه به تغییر ساختار آنتی ژنی ویروس آنفلوانزا ، تغییر مکرر سویه های تولید ایجاد می شود. |
بیانیه RTGA برای شفاف سازی گوه ، تشخیص بیماری |
Parainfluenza diagnosticum نوع 1 ، 2 ، 3 برای RTGA ، خشک است |
مایع کشت (کلیه جنینی انسان) حاوی یکی از سویه های ویروس پاراآنفلوانزا ، تحت درمان با tween-80 ، اتر و مرتیولات |
بیانیه RTGA برای روشن شدن گوه ، تشخیص بیماری |
کتابشناسی - فهرست کتب: Zuev AS Bacterial vi-diagnosticum برای تشخیص ناقلین مزمن باکتری های تیفوئید ، Zhurn ، micr. ، Epid و immun. ، No. 2 ، p. 51 ، 1959 ، کتابشناسی. Zuev A.S. ، Novoselova A.I. و Likina I.V. توسعه یک روش برای تولید O-diagnosticums و H-monodiagnostics و استفاده از آنها در serodiagnostics سالمونلوز ، همان ، شماره 3 ، ص. 42 ، 1956 ؛ ایمونولوژی و پیشگیری از عفونت های روده ، ویرایش شده S.I. Didenko ، p. 180 ، م. ، 1962 ؛ Karalnik BV تشخیص گلبول قرمز ، م. ، 1976 ؛ رهنمودهای تشخیص میکروبیولوژیکی بیماری های عفونی ، ویرایش شده K. I. Matveeva ، p. 172 ، م. ، 1973 ؛ ساب بوتینا یو. ل. و دیگران. تشخیص سرولوژیکی سالمونلوزیس و اتصالات آنتی ژنیک در واکنش با گلبول های قرمز و O-diagnosticums ، Zhurn ، micr. ، Epid و immun. ، شماره 3 ، ص. 19 ، 1970 ، کتابشناسی.
L.B Epiphany.
گواهی ثبت نام شماره RZN 2016/3905 مورخ 04.04.2016
وقت ملاقات
مجموعه معرف ها "Diagnosticum erythrocytic salmonella Vi-antigen for RPHA" (SED-Vi) برای شناسایی آنتی بادی های آنتی ژن Vi عامل آن تیفوئید در سرم خون انسان با واکنش هماگلوتیناسیون منفعل (RPHA) است.
مشخصه را تنظیم کنید
اصول کارکرد، اصول جراحی، اصول عملکرد
در حضور آنتی بادی های عامل تب تیفوئید ، هماگلوتیناسیون گلبول های قرمز مرغ حساس به آنتی ژن مشاهده می شود که منجر به تشکیل "چتر" گلبول های قرمز مستقر در پایین چاه های U شکل قرص می شود. در صورت عدم وجود آنتی بادی در برابر عامل بیماری تب حصبه ، گلبول های قرمز مستقر "یک نقطه" را تشکیل می دهند.
تنظیم ترکیب
نام معرف | شرح | مقدار در یک مجموعه |
---|---|---|
Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigenic، 6٪ خشک (EDC) | گلبول های قرمز مرغ فرمالین شده با آنتی ژن S. typhi Vi حساس شده اند. توده رطوبت خشک از رنگ قهوه ای. پس از انحلال ، سوسپانسیون قرمز قهوه ای است. | 1 بطری ، از 0.6 میلی لیتر |
جذب سالمونلا سرم تشخیصی ، گیرنده Vi ، خشک (رقت 1:20 ، (K +)) | سالمونلا سرم خرگوش جذب شده ، گیرنده Vi ، رقت 1:20. توده متخلخل سفید رطوبت دار خشک. پس از انحلال ، این یک مایع مایل به زرد مایل به زرد یا بی رنگ است. | 1 بطری ، از 0.3 میلی لیتر |
رقیق کننده نمونه (RIP) | مایع آبی-بنفش را شفاف کنید. | 1 بطری ، 10 میلی لیتر |
نمک بافر فسفات (PBS) | مایع بی رنگ شفاف. | 1 بطری ، 10 میلی لیتر |
صفحه پلیمری یکبار مصرف برای واکنشهای ایمنی | صفحه پلیمری یکبار مصرف برای واکنشهای ایمنی ساخته شده از پلی استایرن بی رنگ شفاف. | 1 کامپیوتر. |
مشخصات تشخیصی
Diagnosticum باید در RPHA با سرم جذب شده توسط سالمونلا ، گیرنده Vi ، خشک (با رقت 1:20) تا تیتر مشخص شده روی برچسب سرم آگلوتین شود. سطح شرطی ویژگیهای تشخیصی سرم خون افراد سالم باید رقت سرمی بالاتر از 1:20 باشد. زمان تجزیه و تحلیل 3040 دقیقه است. این کیت برای مطالعه 42 سرم خون در نسخه غربالگری یا 10 سرم خون در نسخه تیتراسیون طراحی شده است.
موارد احتیاط
این کیت فقط برای استفاده در موارد آزمایشگاهی است. مواد موجود در کیت غیرفعال و بی خطر هستند. هنگام کار با کیت ، SP 1.3.2322-08 و SanPiN 2.1.7.2790-10 باید رعایت شود.
تجهیزات و مواد اضافی
تجهیزات ، مواد ، راه حل ها:
- توزیع کننده های پیپت 1 کاناله با حجم دوز متغیر 5 - 40 میکرولیتر. 40 - 200 میکرولیتر 200 - 1000 میکرولیتر و 1000 - 5000 میکرولیتر ؛
- توزیع کننده های پیپت 8- یا 12 کاناله با حجم دوز متغیر 5 - 40 میکرولیتر و 40 - 200 میکرولیتر ؛
- آب مقطر (GOST 6709-72).
نمونه های آنالیز شده
نمونه های سرم خون بررسی شده در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد بیش از 3 روز از لحظه جمع آوری خون ذخیره می شوند. نگهداری سرم در حالت منجمد در دمای بالاتر از منفی 18 درجه سانتیگراد برای مدت بیش از 1 سال مجاز است. قبل از استفاده ، نمونه ها در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد ذوب شده و با تکان دادن مخلوط می شوند. انجماد مجدد مجاز نیست. از نمونه هایی که رشد باکتری و همولیز دارند نباید استفاده شود. قبل از تنظیم واکنش ، سرم های آزمایش شده به مدت 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد گرم می شوند.
تحلیل و بررسی
آماده سازی سرم تشخیصی کنترل (K +)
یک محلول محلول از سرم جذب شده سالمونلا ، گیرنده Vi ، خشک (رقت 1:20) از 0.3 میلی لیتر (K +) تهیه کنید. برای این منظور ، 0.3 میلی لیتر نمک بافر فسفات (PBS) به محتوای ویال با K + اضافه می شود. مقدار باقیمانده سرم را می توان تقسیم کرد و به مدت بیش از 6 ماه در دمای بیش از منفی 18 درجه سانتیگراد ذخیره کرد.
تهیه روش تشخیصی سالمونلا گلبول قرمز (EDS)
برای تهیه رقت کاری سوسپانسیون گلبول قرمز سالمونلا دیاستیکوم ، 0.6 میلی لیتر آب مقطر به محتوای ویال با EDMS 6٪ خشک اضافه شده و به مدت 2 ساعت در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد برای هیدراتاسیون باقی می ماند. سپس 2.4 میلی لیتر محلول بافر فسفات (PBS) به محلول اضافه می شود. محلول کار بیش از 1 ماه در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد ذخیره می شود. انجماد مجاز نیست.
مرحله سازی RPHA برای غربالگری سرم خون
سرم خون برای مطالعات غربالگری در چاه های صفحه بشکل زیر رقیق می شود:
- رقتهای اولیه 1:20 در اولین چاههای صفحه تهیه می شوند ، ابتدا 190 میکرولیتر محلول RIP و سپس 10 میکرولیتر از سرم های مورد مطالعه اضافه می شود. هر سرم با یک نوک جداگانه اضافه می شود و با دقت پیپت می شود (رنگ محلول در چاه ها پس از افزودن سرم باید از آبی بنفش به سبز تغییر کند).
- رقت های غربالگری 1:40 در چاه های دوم با افزودن 25 میکرولیتر محلول PBS و سپس 25 میکرولیتر سرم رقیق شده قبلی و پیپت کاملاً تهیه می شود.
در هر تنظیم RPHA ، لازم است تعیین كنترل تیتر K + انجام شود. برای انجام این کار ، 50 میکرولیتر محلول PBS به 8 سوراخ یک ردیف طولانی اضافه می شود. سپس 50 میکرولیتر از محلول کار K + (1:20) به چاه اول اضافه می شود ، با دقت پیپت می شود و به داخل چاه های بعدی منتقل می شود ، هر کدام 50 میکرولیتر ، رقت های 2 برابر را از 1:40 تا 1: 5120 دریافت می کند. در 4 چاه دیگر ، 50 میکرولیتر محلول PBS برای کنترل SED در صورت عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خود اضافه می شود.
در همه چاههای صفحه با رقتهای غربالگری سرمهای مورد مطالعه (به جز موارد اول حاوی RIP) و شاهدها 25 میکرولیتر EDM اضافه می کنند. سوسپانسیون SED را قبل از استفاده در ویال یا سینی هم بزنید! قرص کاملاً تکان داده می شود و در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 تا 40 دقیقه باقی می ماند تا اینکه گلبول های قرمز کنترل کاملاً جا بیفتند.
فرمولاسیون RPHA در هنگام تیتراسیون سرم خون مورد مطالعه
تیتراسیون سرم های مورد مطالعه و محلول کار K + در ردیف های کوتاه صفحه انجام می شود. یک ردیف کوتاه دیگر برای کنترل عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خودی EDMS استفاده می شود.
در اولین چاه های ردیف های کوتاه برای تیتراسیون سرم آزمایش ، 180 میکرولیتر محلول RIP اضافه می شود. همه چاه های دیگر 50 میکرولیتر محلول PBS اضافه می کنند.
در چاههای دارای محلول RIP ، 20 میکرولیتر از سرم های مورد مطالعه اضافه کنید (رقت 1:10 بدست آورید). هر سرم با نوک مخصوص خود اضافه می شود و با دقت پیپت می شود (رنگ محلول در چاه ها باید از آبی بنفش به سبز تغییر کند). سپس از اولین چاه ها ، 50 میکرولیتر با دریافت رقت های دو برابر از 1:20 تا 1: 1280 به چاه های بعدی ردیف ها منتقل می شوند. در پایان تیتراسیون ، محلول های موجود در حجم 50 میکرولیتر از آخرین چاه ها خارج می شوند.
در هر تنظیم RPHA ، لازم است تعیین كنترل تیتر K + انجام شود. برای انجام این کار ، 50 میکرولیتر محلول PBS به 8 سوراخ یک ردیف طولانی اضافه می شود. سپس 50 میکرولیتر از محلول کار K + (1:20) به چاه اول اضافه می شود ، با دقت پیپت می شود و به داخل چاه های بعدی منتقل می شود ، هر کدام 50 میکرولیتر ، رقت های 2 برابر را از 1:40 تا 1: 5120 دریافت می کند.
برای کنترل عیب یابی عدم وجود هماگلوتیناسیون خود به خود ، 50 میکرولیتر محلول PBS به تمام چاه های یک ردیف کوتاه اضافه می شود.
در همه چاه ها (به استثنای اولین چاه های هر ردیف برای سرم های مورد مطالعه حاوی RIP) 25 میکرولیتر EDM اضافه کنید. سوسپانسیون SED را قبل از استفاده در ویال یا سینی هم بزنید! قرص کاملاً تکان داده می شود و در دمای 16 تا 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 تا 40 دقیقه باقی می ماند تا اینکه گلبول های قرمز کنترل کاملاً جا بیفتند.
حسابداری و تفسیر نتایج
در نظر گرفتن نتایج هنگام غربالگری سرم خون
نتایج با توجه به مقیاس مرسوم چهار تلاقی ثبت می شود. تیتر سرم رقت آن در نظر گرفته می شود ، که حداقل با 3 (+++) کراس هماگلوتیناسیون می دهد.
- ++++ (4+) - گلبول های قرمز آگلوتین شده در پایین سوراخ "چتر" معکوس تشکیل می دهند ، لبه های آن می افتد.
- +++ (3+) - گلبول های قرمز آگلوتین شده "چتری" معکوس در پایین سوراخ ایجاد می کنند ، لبه های آن یکنواخت است.
- ++ (2+) - همراه با گلبول های قرمز آگلوتین شده در پایین چاه رسوبی به شکل یک "حلقه" کوچک از گلبول های قرمز غیر آگلوتین شده وجود دارد.
- + (1+) - اکثر گلبول های قرمز آگلوتین نشده و به شکل یک "حلقه" کوچک ته نشین می شوند.
- (-) - گلبول های قرمز غیر آگلوتین شده "نقطه" ای را در پایین چاه تشکیل می دهند.
یک نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود که هماگلوتیناسیون گلبول های قرمز است که با حداقل 3 عبور (+++) با آنتی ژن Vi بارگیری می شوند.
کنترل کیفیت عیب یابی 4 حلقه ردیف کنترل است که فقط محلول PBS و SED به آنها اضافه می شود. در این چاهها نباید هماگلوتیناسیون خودبخودی وجود داشته باشد - واکنش منفی است (-). در غیر این صورت ، مطالعه باید تکرار شود. اگر هماگلوتیناسیون هنگام تنظیم مکرر ظاهر شود ، از دارو استفاده نمی شود.
سرم های با نتیجه منفی باید فاقد آنتی بادی به آنتی ژن Vi در یک تیتر تشخیصی 1:40 به پایین باشد.
سرمهایی که در رقت 1:40 نتیجه مثبتی می دهند باید در واریانت با تیتراسیون سرم آزمایش شوند تا تیتر آن ثابت شود.
در نظر گرفتن نتایج هنگام تیتراسیون سرم خون
تیتر سرم رقت آن است که باعث هماگلوتیناسیون کمتر از 3 (+++) کراس می شود.
كنترل كیفیت تشخیصی چاه های ردیف كنترل SED است. در این چاهها نباید هماگلوتیناسیون خودبخودی وجود داشته باشد - واکنش منفی است (-). در غیر این صورت ، مطالعه باید تکرار شود. اگر هماگلوتیناسیون هنگام تنظیم مکرر ظاهر شود ، از دارو استفاده نمی شود.