Eritrotsitlar diagnostikasi. Diagnostika
Salmonella VI-antigenik diagnostik reaktivlari passiv gemagglutinatsiya reaktsiyasida (RPHA) inson qon zardobida Salmonella tif Vi-antijeni uchun aniq antikorlarni aniqlash uchun mo'ljallangan.
Xarakteristikani o'rnating
2.1. Usulning printsipi.
Diagnosticum Salmonella VI-antijenikning faol printsipi bu eritrotsitlar yuzasiga o'rnatilgan Vi-antijen. B-antijeniga antikorlarni o'z ichiga olgan zardob bilan o'zaro ta'sirlashganda, eritrotsitlar aglutinatsiyasi fenomeni kuzatiladi.
2.2. KITOZNING TARKIBI
Reaktivlar | miqdori |
Diagnostikum eritrotsitlar salmonellalari Vi-antijenik suyuqlik - Salmonella tifusining Vi-antijeni bilan fosfat bufer eritmasida formallashtirilgan va sezgirlangan qo'chqor eritrositlarining 1% suspenziyasi (pH 7.2) + 0,2; konsentratsiyasi 0,06 mol / l). Yoriqsiz bir hil jigarrang süspansiyon; joylashgandan so'ng 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kindi va shaffof sarg'ish g'ayritabiiy | 1 shisha - 3 ml |
Diagnostik zardobdagi salmonellalar adsorblangan Vi retseptorlari quruq -oqdan jigar ranggacha sarg'ish ranggacha bir hil massa | 1 shisha - 0,1 ml dan |
Formalangan, sezgir bo'lmagan qo'y eritrotsitlarining 1% suspenziyasi - bir hil jigarrang süspansiyon; joylashgandan so'ng 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kindi va shaffof sarg'ish g'ayritabiiy | 1 shisha - |
Sarumni suyultirish va RPHA ni ishlab chiqarish -0,9% natriy xlorid eritmasi aniq rangsiz suyuqlikdir, pH 6,5 dan 7,5 gacha | 2 shisha - har biri 8 ml |
Immunologik reaktsiyalar uchun bitta ishlatiladigan dumaloq taglikli plastinka -8 qatordan iborat bo'lib, ularning har biri shaffof, rangsiz, yumaloq tubi bo'lgan 12 teshikdan iborat | 1 ta kompyuter |
ANITITIK VA DIAGNOSTIK XARAKTERISTIKA.
3.1. Diagnostikumni Salmonella adsorbsiya qilingan B va B retseptorlari zardobida RPHAda kamida 1: 160 nisbatda suyultirish kerak.
Sog'lom odamlarning qon zardobini diagnostik xususiyatlarining shartli darajasi sarumning suyultirilishi 1:20 dan yuqori bo'lmasligi kerak.
3.2. Tahlil vaqti 2 soat.
3.3. To'plam 8 ta ta'rif uchun mo'ljallangan.
EHTIYOT CHORALARI
Kit bilan ishlaganda "SSSR Sog'liqni saqlash vazirligi tizimidagi sanitariya-epidemiologiya muassasalarining laboratoriyalarida (bo'limlari, bo'limlari) ishlayotganda" Qurilma, xavfsizlik choralari, sanoat sanitariyasi, epidemiyaga qarshi rejim va shaxsiy gigiena qoidalariga "rioya qilish kerak (M., 1981).
Tahlil qilingan sarum, shuningdek ular bilan aloqa qiladigan reaktivlar OITV, gepatit virusi yoki boshqa virusli infektsiyani qo'zg'atuvchi yoki uzoq vaqt davomida ushlab turadigan potentsial yuqumli deb hisoblanadi - ularga ehtiyotkorlik bilan munosabatda bo'lish kerak:
- rezina qo'lqop bilan ishlash;
- pipetka qo'yish paytida siz avtomatik pipetkalardan foydalanishingiz kerak;
- ish tugagandan so'ng tahlil qilingan zardob va ular bilan aloqa qiladigan reagentlar, asboblar dezinfektsiyali eritma bilan ishlov berilishi kerak.
- uskunani 70% etil spirti bilan ishlashdan oldin va keyin artib oling.
Tahlil qilingan zardobni 56 min C da 30 minut davomida faolsizlantirish kerak.
Kitga kiritilgan Salmonella diagnostik sarum adsorbsiyalangan B va B retseptorlari faol emas.
Ob'ektiv sinov natijalari quyidagi shartlarda kafolatlanadi:
- to'plamning barcha reaktivlarini 2 dan 8 0 S gacha bo'lgan haroratda saqlang;
- muddati o'tgan reaktivlardan foydalanmang;
- to'plamdagi reagentlardan foydalanmang, agar ularning o'rashlari tegishli ravishda belgilanmagan bo'lsa;
- faqat ushbu to'plamga kiritilgan reagentlardan RPGA o'tkazish.
Narxi: iltimosiga binoan
Miqdorni ko'rsatib, mahsulotingizni savatga qo'shishingiz mumkin
Salmonella VI-antigenik diagnostik reaktivlari passiv gemagglutinatsiya reaktsiyasida (RPHA) inson qon zardobida Salmonella tif Vi-antijeni uchun aniq antikorlarni aniqlash uchun mo'ljallangan.
Xarakteristikani o'rnating
2.1. Usulning printsipi.
Diagnosticum Salmonella VI-antijenikning faol printsipi bu eritrotsitlar yuzasiga o'rnatilgan Vi-antijen. B-antijeniga antikorlarni o'z ichiga olgan zardob bilan o'zaro ta'sirlashganda, eritrotsitlar aglutinatsiyasi fenomeni kuzatiladi.
2.2. KITOZNING TARKIBI
Reaktivlar | miqdori |
Diagnostikum eritrotsitlar salmonellalari Vi-antijenik suyuqlik - Salmonella tifusining Vi-antijeni bilan fosfat bufer eritmasida formallashtirilgan va sezgirlangan qo'chqor eritrositlarining 1% suspenziyasi (pH 7.2) + 0,2; konsentratsiyasi 0,06 mol / l). Yoriqsiz bir hil jigarrang süspansiyon; joylashgandan so'ng 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kindi va shaffof sarg'ish g'ayritabiiy | 1 shisha - 6 ml |
Diagnostik zardobdagi salmonellalar adsorblangan Vi retseptorlari quruq -oqdan jigar ranggacha sarg'ish ranggacha bir hil massa | 1 shisha - 0,1 ml dan |
Formalangan, sezgir bo'lmagan qo'y eritrotsitlarining 1% suspenziyasi - bir hil jigarrang süspansiyon; joylashgandan so'ng 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kindi va shaffof sarg'ish g'ayritabiiy | 1 shisha - |
Sarumni suyultirish va RPHA ni ishlab chiqarish -0,9% natriy xlorid eritmasi aniq rangsiz suyuqlikdir, pH 6,5 dan 7,5 gacha | 2 shisha - har biri 8 ml |
Immunologik reaktsiyalar uchun bitta ishlatiladigan dumaloq taglikli plastinka -8 qatordan iborat bo'lib, ularning har biri shaffof, rangsiz, yumaloq tubi bo'lgan 12 teshikdan iborat | 1 ta kompyuter |
ANITITIK VA DIAGNOSTIK XARAKTERISTIKA.
3.1. Diagnostikumni Salmonella adsorbsiya qilingan B va B retseptorlari zardobida RPHAda kamida 1: 160 nisbatda suyultirish kerak.
Sog'lom odamlarning qon zardobini diagnostik xususiyatlarining shartli darajasi sarumning suyultirilishi 1:20 dan yuqori bo'lmasligi kerak.
3.2. Tahlil vaqti 2 soat.
3.3. To'plam 8 ta ta'rif uchun mo'ljallangan.
EHTIYOT CHORALARI
Kit bilan ishlaganda "SSSR Sog'liqni saqlash vazirligi tizimidagi sanitariya-epidemiologiya muassasalarining laboratoriyalarida (bo'limlari, bo'limlari) ishlayotganda" Qurilma, xavfsizlik choralari, sanoat sanitariyasi, epidemiyaga qarshi rejim va shaxsiy gigiena qoidalariga "rioya qilish kerak (M., 1981).
Tahlil qilingan sarum, shuningdek ular bilan aloqa qiladigan reaktivlar OITV, gepatit virusi yoki boshqa virusli infektsiyani qo'zg'atuvchi yoki uzoq vaqt davomida ushlab turadigan potentsial yuqumli deb hisoblanadi - ularga ehtiyotkorlik bilan munosabatda bo'lish kerak:
- rezina qo'lqop bilan ishlash;
- pipetka qo'yish paytida siz avtomatik pipetkalardan foydalanishingiz kerak;
- ish tugagandan so'ng tahlil qilingan zardob va ular bilan aloqa qiladigan reagentlar, asboblar dezinfektsiyali eritma bilan ishlov berilishi kerak.
- uskunani 70% etil spirti bilan ishlashdan oldin va keyin artib oling.
Tahlil qilingan zardobni 56 min C da 30 minut davomida faolsizlantirish kerak.
Kitga kiritilgan Salmonella diagnostik sarum adsorbsiyalangan B va B retseptorlari faol emas.
Ob'ektiv sinov natijalari quyidagi shartlarda kafolatlanadi:
- to'plamning barcha reaktivlarini 2 dan 8 0 S gacha bo'lgan haroratda saqlang;
- muddati o'tgan reaktivlardan foydalanmang;
- to'plamdagi reagentlardan foydalanmang, agar ularning o'rashlari tegishli ravishda belgilanmagan bo'lsa;
- faqat ushbu to'plamga kiritilgan reagentlardan RPGA o'tkazish.
Vi-diagnostika
Diagnostikum V
Vi-antijenik
2.diagnostikum
4. vayron qilingan mikroblardan (o'ziga xos Agni ajratib olish)
Eritrotsitlar HBs-diagnostikum
2.diagnostikum
4.Ram qon bosimi tanin bilan davolanadi va a / g HB ni tashkil qiladi
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Diagnosticum gp120
2.diagnostikum
A \\ g exceparate qiling. OIV
5. OIV yuqtirganligini aniqlash uchun
Qoqsholni eritrotsitlari diagnostikasi
2.diagnostikum
4.Erning qo'ziqorini, tanin bilan davolangan, qoqshol qo'zg'atuvchisi bilan
5. qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash uchun (qoqsholga qarshi)
Mikro-reseptlash uchun kardiolipin antijeni
2.diagnostikum
4. Sog'lom buqaning yuragidan lipid fraktsiyasini olish
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Ultratovushli treponemal antijen
2.diagnostikum
4. o'ldirilgan eks. sifiliz
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Korpuskulyar tularemiya diagnostikasi
2.diagnostikum
4. Patogenning individual zarralaridan
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Dizenteriya diagnostikasi
2.diagnostikum
O'ldirilgan m / o dan olinadigan quvvat
5. bemorning zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Shigella Sonne tomonidan olingan eritrotsitlar diagnostikasi
2.diagnostikum
4.Qo'y qo'ylarni boqish, nozik ishlov berish
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Salmonella tifimuriyasidan olingan diagnostika
2.diagnostikum
4. o'ldirilgan eks. salmonella
5. Qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash
Zardoblar
Antigangrenoz ot zardobi 5000 IU
2.serum
4. Giperimmun otlarning qon zardobidan qo'zg'aluvchan gaz gangrenasi toksoidi
6. oddiy qilib aytganda, globulin 1: 100 bo'lgan sinovdan so'ng
Odamning immunoglobulin normaldir
2.serum
4. donor sarumidan
5.form-e o'tish. o'ziga xos sotib olingan san'at. imm
6.parenteral
Kuydirgi zardobini cho'ktirish
2.serum
4. giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobidan a / r qo'zg'aladigan sib. oshqozon yarasi
6. Yog'ingarchilik miqdori (RP)
Botulinum sarum turi - A 400 IU
2.serum
5. Sinov materialida ma'lum bir antijeni aniqlash
Zararsizlantirish (RN)
Kuydirgi globulin
2.serum
4. Giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobida a / d eksizlangan yaralar
5.form-e o'tish. o'ziga xos sotib olingan san'at. imm
6.parenteral
Gemolitik zardob
2.serum
4. boshqa turdagi hayvonlarning eritrotsitlari bilan giperimmunlashtirilgan hayvonlarning zardobidan
5. Sinov materialida ma'lum bir antijeni aniqlash
Vabo agglyutinatsion sarum Ogava
2.serum
4. Giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobidan
5. Sinov materialida ma'lum bir antijeni aniqlash
Luminescent Tularemi sarum
2.serum
Giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobidan a / d qo'zg'atuvchi.
5. Sinov materialida ma'lum bir antijeni aniqlash
Odamning malham keltirib chiqaradigan ensefalitiga qarshi immunoglobulin
2.serum
4. donor sarumidan
5.form-e o'tish. o'ziga xos sotib olingan san'at. imm
6.parenteral
ESNO diagnostik zardobi
2.serum
4. ESNO viruslari bo'lgan giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobidan
5. Sinov materialida ma'lum bir antijeni aniqlash
Gepatit B ga qarshi inson immunoglobulin
2.serum
4. Gepatit B ga qarshi emlangan donorning qon zardobidan
5.form-e o'tish. o'ziga xos sotib olingan san'at. imm
6.parenteral
Perkoksidaza bilan belgilangan antiglobulin sarum
2.serum
4. Giperimmunlashtirilgan hayvonlarning qon zardobidan
5. Sinov materialida ma'lum antijeni aniqlash (OIV)
Quturma immunoglobulin
2.serum
4. donor sarumidan
5.form-e o'tish. o'ziga xos sotib olingan san'at. imm
Diagnostikaning faol printsipi - eritrotsitlar yuzasiga o'rnatilgan Vi-antijen. B-antijeniga antikorlarni o'z ichiga olgan zardob bilan o'zaro ta'sirlashganda, eritrotsitlar aglutinatsiyasi fenomeni kuzatiladi.
Chiqarish shakli
Diagnostika - 1 ml dan 1 shisha to'plamda ishlab chiqariladi, tashxisiy zardobdagi salmonella adsorblangan retseptori Vi liyofilizat shaklida 0,1 ml dan 1 shishadan; 0,9% natriy xlorid eritmasi - 8 ml dan 2 flakon; immunologik reaktsiyalar uchun bir martalik tabletka - 1 dona.
Tarkibi
Reagentlar soni:
Fosfat tampon eritmasidagi O (I) qon guruhidagi odamning rasmiylashtirilgan va sezgirlangan B-antijeni bo'lgan eritrotsitlarining 0,75% suspenziyasidan iborat bo'lgan eritrotsitlar salmonella B-antijeni diagnostikasi (pH-7,2 ± 0,2; konsentratsiyasi - 0,06 mol / L). Himoya vositasi formalin. Yoriqsiz bir hil jigarrang süspansiyon; O'rnatish jarayonida 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kmasi va shaffof sarg'ish supernatant suyuqlik 1 shisha-3 ml.
Zardob diagnostik salmonellalari adsorbsiyalangan B retseptorlarini quruq - bir hil massadan oqdan jigar ranggacha sarg'ish ranggacha. 1 shisha - 0,1 ml dan.
Qo'llab-quvvatlash eritmasi - 0,9% natriy xlorid eritmasi - tiniq, rangsiz suyuqlik, pH 6,5 dan 7,5 gacha. 2 shisha - har biri 8 ml.
Immunologik reaktsiyalar uchun bitta ishlatiladigan dumaloq taglik plitasi - 8 qatordan iborat bo'lib, ularning har biriga shaffof, rangsiz, yumaloq tubi bo'lgan 12 quduq kiradi. 1 ta kompyuter.
Diagnostikumni RPHA ga aglutinatsiya qilish kerak, bunda diagnostik zardobdagi salmonellalar adsorbsiyalangan B va B retseptorlari titrlarining 1/2 dan ko'p bo'lmaganida, lekin 1/160 dan kam bo'lmagan miqdorda suyultiriladi. RA uchun quruq adsorbsiyalangan salmonella sera tashxis qo'yish uchun diagnostikumni aglutinlash mumkin emas: O retseptorlari 9 - 1:40 va undan yuqori suyultirishda, H retseptorlari d - 1:10 va undan yuqori suyultirishda.
Qo'llash uchun ko'rsatmalar
Passiv gemagglutinatsiya reaktsiyasida (RPHA) inson qon zardobida Salmonella tifus Vi-antijeni uchun aniq antikorlarni aniqlash uchun mo'ljallangan.
Dozalash tartibi va qo'llash usuli
Odam zardobidan olingan namunalar tahlil qilingan namunalar sifatida ishlatiladi.
Tahlil qilingan namuna bakteriyalarning 2 dan 8 ° C gacha bo'lgan haroratda 72 soatdan ko'p bo'lmagan davrda saqlanishida saqlanadi. Muzlatishga ruxsat beriladi, muzlatilgan tahlil qilingan namunalarni sinovdan oldin xona haroratida eritib yuborish kerak.
Talab qilingan gemoliz, bakteriyalarning ko'payishi, shuningdek uzoq vaqt muzlatmasdan yoki qayta muzlatmasdan saqlanib qolgan namunalarni tahlil qilishga yo'l qo'yilmaydi.
TAHLIL
RPHA uchun eritma tayyorlash.
Adsorbsiyalangan B va retseptorlari tashxis qilingan salmonella zardobining quruq ochilgan flakonlariga 1 ml biriktirilgan 0,9% natriy xlorid eritmasidan qo'shing va shu bilan ishlaydigan suyultirish hisobiga 1:10 suyultiriladi.
Diagnostik zardobli salmonella zardobli ochiq flakon, 1: 10 nisbatda suyultirilgan holda yopiq shaklda Bi retseptorlarini quritadi, 2 oydan 8 ° C gacha bo'lgan haroratda bir oy davomida saqlanishi mumkin.
Diagnostikum foydalanishga tayyor. Shishani diagnostikum bilan ochishdan oldin, bir hil suspenziya olinmaguncha muloyimlik bilan chayqash kerak. Ish paytida silkitishni takrorlash tavsiya etiladi.
Tashxis qo'yilgan yopiq shisha 2 oydan 8 ° C gacha bo'lgan haroratda bir oy davomida saqlanishi mumkin.
0,9% natriy xlorid eritmasi. Foydalanishga tayyor.
RPGA o'tkazish.
Tahlil qilingan qon zardobini har qanday miqdorini nazorat qilishda diagnostika zardobida Salmonella adsorbsiyalangan B va quruq retseptorlari bilan 1 seriyali aglutinatsiyani o'rnatish kerak.
RPHAni o'rnatish uchun bir martali ishlatiladigan immunologik reaktsiyalar uchun plastinkadan foydalaning. 1:10 dan 1: 2560 gacha va diagnostik salmonella zardobida adsorbsiyalangan B retseptorlari quritilgan, 1:10 dan boshlab, 0,05 ml natriy xlorid eritmasining 0,05 ml eritmasida ikki marta ketma-ket eritmalar tayyorlang. , ushbu zardob flakonlarining yorlig'ida ko'rsatilgan titrni ikki baravarga oshirish.
Zardobni suyultirish bilan har bir quduqqa 0,025 ml diagnostikum qo'shing.
Majburiy boshqaruv elementlari:
1. Zardobdagi diagnostik salmonellalar adsorbsiyalangan retseptorlarini boshqarish
Biz quruq va tahlil qilingan zardobni hosil qilamiz, uni 0,05 ml hajmida 1:10 seyreltamiz
ikkita nazorat qudug'ida.
2. Diagnostikaning o'z-o'zidan aglutinatsiyasi yo'qligini tekshirish, buning uchun 0,025 ml diagnostika 0,05 ml 0,9% natriy xlorid eritmasidan iborat ikkita quduqqa qo'shiladi.
Planshet silkitiladi va 1,5-2,0 soat davomida (37 + 1) ° S haroratda termostatga joylashtiriladi.
Natija
Reaksiya to'rt qavatli tizim bo'yicha hisobga olinadi:
4+ - barcha eritrotsitlar aglutinlanadi va quduq tubini teng ravishda qoplaydi;
3+ - deyarli barcha eritrotsitlar agglyutinatsiyalangan. Ularning fonida, aglutinlanmagan eritrotsitlarning aniq bo'lmagan halqasi mavjud;
3+ - quduq tubida yagona agglutinat bilan bir qatorda, kichik "halqa" yoki "tugma" shaklida aglutinlanmagan eritrotsitlar cho'kmasi mavjud;
1+ - eritrotsitlarning aksariyati aglutinatsiyalanmaydi va teshik tubining o'rtasiga silliq qirralari bilan "tugmachalar" shaklida joylashadi.
(-) - aglutinatsiya belgilari yo'q. Eritrositlar quduqning markazida yoki sinov naychasining pastki qismida silliq qirralari yoki tugmachalari bo'lgan kichik "halqa" shaklida joylashdi.
Ijobiy reaktsiya kamida 3+ deb hisoblanadi.
RPHA-da olingan natijalarni ishonchli deb hisoblash mumkin, agar diagnostik salmonellalar adsorbsiyalangan Bi retseptorlari zardobi quruq 1:10 dan kamida 14 titrni suyultirishda ijobiy natija olgan bo'lsa va tahlil qilingan zardob bilan 2 ta quduqda va tashxis qilingan salmonellalar adsorbsiyalangan retseptorlari Bi bilan suyultirilgan bo'lsa. 1:10 eritmalarida quruq bo'lmang, cho'kma va cho'kindi bo'lmasligi kerak; 0,9% natriy xlorid eritmasi va diagnostikum bilan quduqlarda - reaktsiya salbiy.
Tahlil qilingan zardobning antikor titri sarumning so'nggi seyreltilishi deb hisoblanadi, u hali ham eritrotsitlarning ijobiy aglutinatsiyasini beradi.
Natijalarni sharhlash.
Vi-antijeni antikorlari 1:40 va undan yuqori suyultirilganligi aniqlangan odamlar surunkali tifoid bakterial tashishida shubhali hisoblanadi. Ammo tashxisni faqat serologik tadqiqotlar asosida o'tkazish mumkin emasligi sababli, chuqur bakteriologik tekshiruv zarur.
Foydalanish bo'yicha ehtiyot choralari
To'plamga adsorbsiyalangan Salmonella B saratoni va quruq inaktivlangan retseptor kiradi.
Tahlil qilingan zardobni 56 ° C da 30 daqiqa davomida faolsizlantirish kerak.
Tahlil qilingan sarum, shuningdek reaktivlar, asbob-uskunalar va ular bilan aloqada bo'lgan vositalar yuqumli bo'lishi mumkin va ularni ehtiyotkorlik bilan ishlatish kerak:
- rezina qo'lqoplar bilan ishlash;
- quvurlashda avtomatik qurilmalardan foydalanish kerak;
- ish tugagandan so'ng tahlil qilingan zardoblar va ular bilan aloqa qiladigan reaktivlar, asboblar dezinfektsiyali eritma bilan ishlov berilishi kerak;
- Ishdan oldin va keyin uskunani 96% etil spirti bilan artib oling.
Ob'ektiv sinov natijalari quyidagi shartlarda kafolatlanadi:
- to'plamdagi barcha reaktivlarni 2 dan 8 ° S gacha haroratda saqlang;
- muddati o'tgan reaktivlardan foydalanmang;
- to'plamdagi reagentlardan, agar ularning o'ramida tegishli belgilar bo'lmasa, foydalanmang;
- RPHA o'tkazish uchun faqat ushbu to'plamga kiritilgan reagentlardan foydalanish.